关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中-于都中学.pptVIP

练习 1.不能作为异养微生物碳源的是（ ） A．牛肉膏　B．含碳有机物 C．石油　　D．含碳无机物 2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是（ ） 　A．碳源　　B．氮源 　C．无机盐　D．生长因子 3.下列关于生长因子的说法中，不正确的一项是 （ ） 　A．是微生物生长不可缺少的微量有机物 　B．是微生物生长不可缺少的微量矿质元素 　C．主要包括维生素、氨基酸和碱基等 　D．一般是酶和核酸的组成成分 思考： 1. 获得纯净培养物的关键？ 2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？（P15旁栏思考） 3. 消毒和灭菌有何不同？ 4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些？ （2）灭菌 a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌 练习 ①对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试 管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养 基所需的原料： _________________________________ 其中提供氮源的主要是_______； 提供能源的主要物质是_______； 琼脂的作用是_______，它不提供营养。 牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、琼脂 蛋白胨 牛肉膏 练习 ①对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试 管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养 基所需的原料： _________________________________ 其中提供氮源的主要是_______； 提供能源的主要物质是_______； 琼脂的作用是_______，它不提供营养。 牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、琼脂 蛋白胨 牛肉膏 凝固剂 练习 ②微生物在生长过程中对各种成分所需量 不同,故制备培养基时各成分要有合适的 _____,在烧杯加入琼脂后要不停地_____, 防止_____________________. 练习 ②微生物在生长过程中对各种成分所需量 不同,故制备培养基时各成分要有合适的 _____,在烧杯加入琼脂后要不停地_____, 防止_____________________. 比例 练习 ②微生物在生长过程中对各种成分所需量 不同,故制备培养基时各成分要有合适的 _____,在烧杯加入琼脂后要不停地_____, 防止_____________________. 比例 搅拌 练习 ②微生物在生长过程中对各种成分所需量 不同,故制备培养基时各成分要有合适的 _____,在烧杯加入琼脂后要不停地_____, 防止_____________________. 比例 搅拌 琼脂糊底引起烧杯破裂 练习 ③将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加 棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 ___________中灭菌，压力为________， 温度为______，时间__________， 灭菌完毕拔掉电源， 待锅内压力____________，将试管取出。 ①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。 ②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。 ③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。 ④紫外线消毒。 ⑴.消毒的方法： 3.常用的消毒与灭菌的方法 表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线 灭菌法，所用器械是 紫外灯 。照射30min，可先喷洒石炭酸或煤酚皂溶液加强消毒效果。 灼烧灭菌 微生物的接种工具 (接种环、接种针)或其他金属用具直接在火焰的充分燃烧层灼烧 注意适用范围 干热灭菌 160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干燥的物品( 玻璃器皿) 高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃ 15-30min 通常用于培养基的灭菌 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 ⑴培养细菌用的培养基与培养皿 ⑵玻棒、试管、烧瓶和吸管 ⑶实验操作者的双手 答：（1）、（2）需要灭菌； （3）需要消毒。 P16旁栏思考 二.实验操作(以培养大肠杆菌为例) ㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基 1.计算 2.称量 3.溶化 4.灭菌: 将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。 5.倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种。 倒平板操作 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 问题讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培