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摘 要
从109株不同来源的面包酵母菌中筛选到4株在高浓度麦芽糖中发酵性能
良好、生物量高、生抱率高的二倍体菌株,分别对这4株菌进行单抱分离、单
倍体鉴定与筛选,获得性状优良的单倍体菌株。采用终浓度为1%的DES对单
倍体菌株进行诱变处理,最终获得22株营养缺陷型突变菌株,经过鉴定从中选
出性状优良的单倍体营养缺陷型菌株:BL56-84-1(MATa,ura-,leu-),
BL61-110-16(MATa,ura几leu-),BL68-102-28 (MATa,arg),BL92-99-16
(MATa,leu一)o
通过融合、杂交相结合的方法,将生物量高、麦芽糖利用较好的
BL68-102-28和生物量较高、耐高糖的BL92-99-16融合后,与本实验室保存的
强絮凝性的单倍体菌株L-77(MATa,ura几leu-,FLO1)杂交,获得一株具有以上
多种优良性状的三倍体菌株ZLFH-121(MATa/a/a,FLOI),其生物量、耐高
糖能力、麦芽糖酶活均比原始亲株高,絮凝性强。
此外,通过酵母转化与杂交相结合的方法,将絮凝基因转入生物量较高、
耐高糖的BL56-84-1(MATa,ura乙leu),得到的转化子 BL56-84-1-10
(MATa凡Ol,leu-)与生物量高、麦芽糖利用较好的BL61-110-16(MATa,ura-,
leu-)杂交获得了一株具有优良性状的二倍体菌株ZLTH-58(MATa/a,FLOI,
leu一),生物量、麦芽糖发酵能力、絮凝能力均高于原始亲株。
对三倍体菌株ZLFH-121和二倍体菌株ZLTH-58的发酵条件进行了优化,
确定了优化发酵条件为:培养基组成为 12%糖蜜、0.1%磷酸、0.5%尿素,初
始pH7.0(灭菌后变为pH6.2),30m/l250ml装液量,10%接种量,在280C摇床
(200r/min)培养发酵35h.
关键词:面包酵母,杂交,融合,FLO1基因的克隆和表达
Abstract
LiuChunxiu(Genetics)
DirectedbyZhangBorun
4strainswithhighbiomass,high-sugar-toleranceandgood-maltose-utilization
werescreenedrfom109bakersyeaststrainsrfomdifferentsources.Haploidsofthe
4strainswereisolatedand4haploidswithgoodqualitieswereobtained,thenthe
haploidsweremutagenizedand22auxotrophicmutantswereacquiredafter
screenedrfommorethan40thousandcolonies.4auxotrophicmutantswithbetter
qualitiesthanparentswereusedforfurtherresearchwork:BL56-84-1(MATa,ura-,
leu-),BL61-110-16(MATa,ura-,leu一),BL68-102-28(MATa,arg),BL92-99-16
(MATa,leu-)
StrainZLFH-121(MATa/a/a,FLOI)wasconstructedbyprotoplastsfusion
combinedwithmass-mating.TheprotoplastsofBL68-102-28andBL92-99-1were
fusedandstrainZLF-12withgood-maltose-utilizationandhighbiomasswasgot.ZLF-12
washybridedwithL77(MATa,ura一leu,FLOI).FinallystrainZLFH-121with
severalgoodqualitieswasgot.StrainZLFH-121hasbetterqualitiesthanparent
strains.
BakersyeaststrainZLTH-58(MATa/a,FLOl,leu)withhighbiom
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