miR-129-1-3p在浆液性卵巢癌中的表达分析及其意义.docVIP

精品论文 参考文献 miR-129-1-3p在浆液性卵巢癌中的表达分析及其意义 耿会欣 　　（河北省唐山市妇幼保健院妇科 河北 唐山 063000） 　　【摘 要】目的：观察miR-129-1-3p于注浆液卵巢组织和普通输卵管散端组织内的表述，同时研究miR-129-1-3p和卵巢浆液上皮癌临床病例特征关系。方法：使用实时荧光定量聚合酶链的反应定力对200例浆液性卵巢上皮癌组织和100例普通输卵管伞端的组织内miR-129-1-3P实施表达，同时把最终的检测结果和临床与病理特征资料实施统计学的分析。结果：浆液性的卵巢癌组织内的miR-129-1-3p其所呈现出来的表达量要明显比普通输卵管伞端组织的更低。miR-129-1-3p的表达和FIGO分期、病例的分化程度、血清CA125以及病人年龄等没有统计学差异，即P＞0.05。结论：miR-129-1-3p可能是现阶段有效抑制癌因子实施参与卵巢上皮性癌的出现，在一定程度上说对卵巢的上皮性癌有一定的辅助和诊??的效果，这样就为有效寻找卵巢上皮性癌生物靶向治疗有效的提供了相关依据。 　　【关键词】miR-129-1-3p；浆液性卵巢；分析 　　【中图分类号】R737. 31 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）8-0715-02 　　卵巢癌的病理类型相对较为复杂，其上皮性癌占据绝大多数，涵盖浆液性癌以及粘液性癌和子宫内膜样癌此几种类型，在这几种病理中，浆液性的卵巢癌是最主要的。该病理具有早期癌症的隐匿、很容易转移与广泛播散生物学行为，超过三分之二的病人在就诊时发现癌细胞已经扩散，正常情况下五年的生存率仅仅为30％。近些年通过临床学者研究表明miRNA可以有效的调节控制部分致癌基因与抑制癌基因表达而最终对细胞的增值造成影响。分析显示，miRNA表达谱表明在多个肿瘤组织中均可能直接有miRNA表达失调，所以可以直接推断此类失调的表达和肿瘤出现发展之间的关系。研究表明miR-129-1-3p于肝癌以及胃癌出现或者发展中有着十分重要的调解控制效果，不过在卵巢上皮性的癌症中其作用的机制还不是特别明显，国内外目前还没有相关报道。 　　1 资料与方法 　　1.1 临床资料 　　选取2010年2月至2014年2月在我院接受治疗的浆液性卵巢癌石头腊病人200例作为研究对象，病人在医院接受治疗期间的上皮性卵巢癌病人实施手术或者化学治疗之前，标本的采集需要征得患者和患者家属的完全统一之后开始实施，分期参照FIGO病理分期标准。而相关病理的诊断则通过资深的病理专家实施，100例普通的输卵管伞端石蜡组织的标准作为此次研究的对照人群。 　　1.2 治疗方法 　　1.2.1 总RNA提取 　　把石蜡包埋组织有针对性的切成8um薄片times;十张，使用二甲苯作为石蜡的组织切片脱蜡，依据miR-Neasy FFPE LIt的试剂说明实施RNA的有效提取，在提取过程中严格按照说明书的操作流程和要求实施。使用Gene Company Linited的核酸蛋白分析器对RNA溶液OD260/OD280的光密度数值OD以及RNA的纯度与浓度实施有效检测，在OD260/OD280大于1.8，同时小于2的情况下可以实施下一步的检测。 　　1.2.2 反转录 　　因为miRNA分子相对不大，尽管RT-PCR方法是现阶段对基因实施检测表达最科学合理的方法，不过不能使用常规的RT-PCR实施检测，在检测的过程中往往要设计特殊性的茎环RT引物，尽管于miRNA分子的末端可以加poly（A）尾，之后用5端带延伸的序列Olig-dT引物实施反转录，在此过程中样本的RNA可以依据不完全相同的样本浓度通过一系列的等值换算之后添加，需要特别注意的是，添加的量应该大于10mg，同时要小于2ug，另外可以使用RNase-free water补足到7ul。miRNA的反转录反应的体系如下表1所示，把以上逆转录的反应体系有效的防止在冰中实施操作。当然应该严格按照相关标准，在37摄氏度的条件下可以孵育一个小时，在95摄氏度的条件下应该孵育5分钟，之后将其放置冰块上如果不会即刻实施PCR，则反转录之后的cdna应该在零下29摄氏度的环境下实施保存。 　　 　　1.3统计学分析 　　采用SPSS16.0统计学软件进行统计学分析，计量资料用( plusmn;s)表示，组间差异、组内差异采用t检验，计数资料比较采用chi;2检验 ，P＜0.05时为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 miR-129-1-3p于浆液性的卵巢癌表达 　　实时荧光定量的PCR检测，此次实验的扩增曲线可以发现上皮性的卵巢癌内其miR-129-1-3p的最终CT数值要比普通的输卵管伞端患者要高出不少，这在某种程度上说要比普通人更低