TCRbeta链基因重排中B１２２３限制的研究进展.docVIP

精品论文 参考文献 TCRbeta链基因重排中B１２２３限制的研究进展 李月红　杨丽文 　　遵义医学院免疫学教研室,贵州省免疫学研究生　教育创新基地　贵州　遵义　５６３０００ 　　【摘要】　染色体胚系基因重排,产生的TCR和BCR(Ig)数量众多,它们是保证机体对种类繁多的抗原产生特异性应答的分子基础.了解TCRB链V(D)J 基因重排的详细机制,对研究机体适应性免疫应答具有重要意义.近年来研究发现,V(D)J基因重排时遵循１２/２３规则即含有１２对碱基间隔序列的RSS仅和含有２３对碱基间隔序列的RSS发生重排.但是,在TCRB链中,我们发现一种超越了１２/２３规则的限制,被称为B１２/２３.本文就TCRB链基因重排中B１２/２３ 限制的相关研究进展予以综述. 【关键词】　TCRB链;　V(D)J基因重排;　B１２/２３规则;　RSS;　RAG－１;　RAG－２ 【中图分类号】R７３３．１ 【文献标识码】B 　　【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１０－０２１７－０２　　 　　TCRB链基因是由V、D、J基因片段组成,每个基因片段都含有侧翼序列RSS.RSS由保守的七聚体、非保守的１２或２３对碱基组成的间隔序列和保守的九聚体组成.V(D)J基因重排时遵循１２/２３规则:含有１２对碱基间隔序列的RSS仅与含有２３对碱基间隔序列的RSS发生重组.然而,我们在TCRB链基因重排中发现:DB１２－ RSS和VB２３－RSS会发生重排,但是JB１２－RSS与VB２３－ RSS之间却没有直接的重排发生,这种现象超越了１２/２３规则的限制,被称为B１２/２３限制.本文就TCRB 链基因重排中B１２/２３限制的发生机制的相关研究进行综述. 　　１ 　TCRB基因重排TCRB 链VB和JB基因片段的侧翼分别为２３RSS和１２RSS,而DB侧翼５＇端为１２RSS、３＇端为２３RSS１.TCRB链基因重排中DB－JB重排在VBDJB重排之前[２].Ferrier和Gartner[３,４]等经过研究证实了B１２/２３限制,并且还提出了一个可能性即５rsquo;Db１２－RSSs可以靶向重排VB基因,而JB基因不可以.大量研究结果还显示V(D)J重排的效率可被RSS和它们侧翼的编码、非编码序列所影响[３,４]. 　　２　RSS与B１２/２３限制为了了解RSS在TCRB基因重排中的作用,Bassing[５]等利用干细胞技术和转基因技术生成了RAG－２－/－JB１omega;/omega;小鼠,该小鼠TCRB链经修饰后只含有一个DB(DB１)基因片段和一个JB(JB１)基因簇,然而D－JB２基因簇的缺失并没有明显改变该小鼠D－JB１的重排情况也没对alpha;beta;T 细胞的发育产生明显的影响.为了测定体内特定的RSS的功能,Bassing[５]等把JB１omega;等位基因中的５lsquo;DB１１２－RSS替换成JB１．２１２－RSS,别的都不变,得到JB１M４等位基因. 结果该等位基因中VB－DB１重排显著减少,相应地,JB１M４/M４小鼠在胸腺细胞发育过程中DN 阶段出现了严重的阻滞,且外周血T 细胞的数目减少.该实验研究显示５rsquo;DB１１２－RSS是与VB进行有效重排所必需的部分,超越了１２/２３规则的限制.接下来,研究者们又得到突变基因JB１M３－－删除JB１omega;等位基因中的DB１ 和它的侧翼RSS;突变基因JB１M５－－JB１M３中JB１．２１２－RSS被５lsquo;DB１１２－RSS替换.研究结果说明５rsquo;DB１和其侧翼RSS没有阻止VB－JB的直接重排[５];在JB１omega;等位基因中,若要VB与JB发生有效的重排,则必须要有DB１在中间介导参与. 　　３　B１２/２３限制与TCRB重排规则有研究结果显示,B１２/２３限制是在V(D)J重排过程中DNA 裂解开始或裂解之前发挥作用的[９].FranchiniD－M１０等研究发现V(D)J重排的启动开始是把单链DNA 缺口引入到含１２对碱基间隔序列的RSSs上,然后再与含有２３对碱基间隔序列的RSS结合形成一个１２/２３RSSs突触,该突触可以使耦合的DNA 裂解.此时,再给TCRB位点上的RSS缺口做上标记,随后发现这些缺口都只在与DB 相关的RSSs上能才检测的到.实验说明DB１２－RSS和DB２３－RSS不仅启动了V(D)J重排,而且还各自捕获与其相对应的VBRSS和JBRSS.而后,在体内和体外的实验也进一步证明了DB１２３－RSS阻碍了其相邻的DB１１２－RSS的裂解.因此要做到VB－DB１重排,必须要把DB１２３－RSS切除掉.以上实验从分子水平上说明了在V(D)J重排过程中D－JB重排要先于V－DJB 重排的原因. 　　４　小结