丁苯酞对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子影响的研究.docVIP

精品论文 参考文献 丁苯酞对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子影响的研究 1.华北石油总医院 神经内科 河北任丘 062552；2.湖北医药学院第四临床学院 湖北十堰 442000； 3.渤海石油职业学院 河北任丘 062552 【摘 要】观察应用丁苯酞治疗对急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子（VEGF）浓度的变化的影响，并与非丁苯酞治疗的脑梗死患者及正常健康人比较，以期发现血管内皮生长因子在脑梗死患者血液中的变化规律，及丁苯酞对血管内皮生长因子浓度、脑梗死的临床疗效的影响，探索其临床用药的安全性和有效性，揭示丁苯酞改善脑循环的机制，从而完善丁苯酞的药理作用。 【关键词】丁苯酞；脑梗死；血管内皮生长因子；疗效；NIHSS评分 血管内皮生长因子又称血管调理素，是一种内皮细胞特异性有丝分裂原，具有促进内皮细胞增生、转移，增加血管通透性和促进血管生成的作用。丁苯酞是我国具有自主知识产权的一类新药，临床主要用于缺血性脑血管病的治疗，研究表明丁苯酞与传统的抗缺血药物不同在于其作用靶点比较广泛，可作用于多个环节，目前发现丁苯酞具有：①保护线粒体，改善脑缺血组织的能量代谢。②抑制细胞内乳酸脱氢酶的释放，保护神经细胞，降低细胞死亡率。③改善脑循环和脑血流。④抑制细胞内钙离子超载。⑤抗缺血后炎症反应。⑥抗氧自由基产生。⑦保护血脑屏障。⑧降低热休克蛋白（HSP）70 mRNA及c-fos的表达。⑨抑制神经细胞凋亡等作用。 本研究目的是观察应用丁苯酞治疗脑梗死患者血清血管内皮生长因子浓度的变化，并与常规治疗的脑梗死患者及正常健康人作对照，比较其血清血管内皮生长因子浓度的变化，以及脑梗死后不同时间点血清血管内皮生长因子浓度的变化，以期发现血管内皮生长因子在脑梗死患者血液中的变化规律，及丁苯酞治疗对血管内皮生长因子变化的影响，揭示丁苯酞改善脑循环的机制，完善丁苯酞的药理作用，并观察丁苯酞治疗脑梗死的临床疗效及安全性。 一、研究过程 （一）研究方法 100例急性脑梗死患者，按入院顺序随机以1：1比例分为治疗组和对照组，中途不能完成实验的剔除，后面进???补充以保证实验人数。对照组50例男性28例，女性22例，年龄55～78岁，平均59.04plusmn;6.88岁，大梗死灶10例，中梗死灶23例，小梗死灶17例。常规给予抗凝、抗血小板、保护脑细胞、活血化瘀及对症治疗14天。治疗组50例，男性30例，女性20例，年龄47～79岁，平均58.5plusmn;6.25岁，大梗死灶12例，中梗死灶19例，小梗死灶19例。在对照组治疗基础上加用丁苯酞软胶囊0.2g/次，3/d，治疗14天。正常健康对照组30例，男性19例，女性11例，年龄48～67岁，平均57.87plusmn;5.15岁。各组年龄、性别分布经齐同性检验后差别无显著性差异（P＞0.05），治疗组和对照组在发病时间、病灶部位、体积，神经功能评分及伴随疾病等方面检验无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。 （二）标本的采集及处理： 全部受试者均于清晨空腹采静脉血6ml，纳入研究的急性脑梗死组患者均于24小时内、3天、7天、14天各抽静脉血6ml，血标本在室温下静置30分钟，3000转离心20分钟，收集血清，分装后于-40℃冰箱保存备检。 1.检测方法：采用双抗体夹心ELISA法进行检测。 2.所用仪器和试剂盒： Thermo全自动酶标仪，芬兰生产；MULTISKAN MK3型洗板机，芬兰生产；-40℃冰箱，海尔公司生产；恒温水浴箱，北京光明医疗仪器厂生产；Jingli LD4-1.8高速离心机，北京生产；AE-200精密分析天平，瑞士产；全自动紫外分光光度计，美国Perkon Elmer公司；高精度移液器，日本Nichoryo立洋；血管内皮生长因子试剂盒，北京晶美试剂公司。 3.操作步骤（严格按照说明书进行操作）： 1）从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃冰箱保存。 2）标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设5个标准品孔，第一孔中加标准品100mu;l，再加标准品稀释液50mu;l，混匀；自第一孔中取100mu;l液体加到第二孔，然后在第二孔加标准品稀释液50mu;l，混匀；在第二孔中先取50mu;l弃掉，然后取50mu;l加到第三孔中，取标准品稀释液50ul加入第三孔中，混匀；从第三孔中取50mu;l液体加到第四孔中，然后在第四孔中加标准品稀释液50mu;l，混匀后从第四孔中取50mu;l液体加到第五孔，然后在第五孔中加标准品稀释液50mu;l，混匀后从第五孔中取50mu;l弃掉。稀释后各孔加样量均为50mu;l，浓度分别为（48