中药植物雌激素对人晶状体上皮细胞雌激素受体表达的影响与信号转导机制研究.docVIP

精品论文 参考文献 中药植物雌激素对人晶状体上皮细胞雌激素受体表达的影响与信号转导机制研究 （广州市番禺区大石街社区卫生服务中心 广州 440113） 【摘 要】目的：研究中药植物雌激素对人晶状体上皮细胞（HLEC）雌激素受体（ER）表达的影响并分析其信号转导机制。方法：应用中药植物雌激素蜕皮甾酮（ECR）与人晶状体上皮细胞共同孵育，采用雌二醇（E2）作为本次研究阳性对照，在应用过氧化氢对人晶状体上皮细胞形成氧化损伤，应用流式细胞术（FCM）检测雌激素受体蛋白其表达受不同浓度（10-6、10-7、10-8mol/L）蜕皮甾酮的影响。结果：随着蜕皮甾酮浓度上升，其ERalpha;、ERbeta;蛋白逐渐上升，表现出明显的浓度依赖相关。结论：中药植物雌激素蜕皮甾酮可能机制是上调由过氧化氢处理的人晶状体上皮细胞其雌激素受体表达继而发挥抗氧化损伤机制，从而达到防治年龄相关性白内障作用。 【关键词】中药植物雌激素；人晶状体上皮细胞 【中图分类号】R776.1 【文献标识码】C 【文章编号】1004-6194（2015）02-0398-02 【Abstract】Objective: to study the traditional Chinese medicine plant estrogens in human lens epithelial cells (HLEC) the influence of estrogen receptor (ER) expression and analyze its signal transduction mechanism. Methods: the traditional Chinese medicine plant estrogen molting sterone and human lens epithelial cells (ECR) common incubation, the estradiol (E2) as positive control, the study on application of hydrogen peroxide in human lens epithelial cells form oxidative damage, flow cytometry (FCM) is applied to detect the estrogen receptor protein expression by different concentrations (10-6, 10-7, 10-8 mol/L) molting sterone influence.Results: And with this rise of sterone and its ER alpha, beta protein ER gradually rise, showing obvious concentration dependent.Conclusion: Chinese medicine plant estrogen molting sterone possible mechanism is raised by hydrogen peroxide treatment human lens epithelial cells of the estrogen receptor expression and then play against oxidative damage mechanism, so as to achieve the prevention and treatment of age-related cataract. 【key words】traditional Chinese medicine plant estrogen; Human lens epithelial cells 作为从中老年开始进展发生的晶状体混浊，老年性白内障随着年龄增加其患病率也显著上升[-2]。蜕皮甾酮（ECR）是中成药牛膝的有效单体成分，本次研究从雌激素受体相关角度对蜕皮甾酮对氧化应激状态下人晶状体上皮细胞的影响及其信号转导机制作出讨论，探讨老年白内障发病机制及防治办法。 1 材料与方法 1.1使用仪器 流式细胞仪、二氧化碳培养箱、超低温冰箱、微量移液器、倒置相差显微镜、超净工作台。 1.2主要试剂 雌二醇(E2)粉末，纯度97%；蜕皮甾酮(ECR)粉末，纯度96.3%,；胰蛋白酶，DMEM培养基干粉；兔抗人ERalpha;、ERbeta;多克隆抗体,异硫氰酸荧光素(HTC)标记的羊抗兔抗体。 1.3实验方法 1.3.1 人晶状体上皮细胞培养 将冷冻保存去冻存管内的