生物医药产业—21世纪的黄金产业.docVIP

第四部分　生物医药产业—21世纪的黄金产业 4.1　引言 人类使用抗体疫苗接种避免传染病源可以追溯至两千多年前的中国，历史十分久远。18世纪，疫苗接种在欧洲获得了成功。19世纪，人类首次尝试使用动物或人体血液中的免疫活性成分来治疗疾病，如使用毒素免疫动物所产生的血清（白喉毒素或病毒）可以治疗同种病毒引起的人类疾病。19世纪80年代，Von Behring发明了一种可以中和细菌毒素（但不能杀死细菌）的抗毒素，并接着发明了血清疗法。1901年，凭借这一发现成果，他荣获了第一个诺贝尔医学奖。 1975年，分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在 HYPERLINK /view/3687.htm \t _blank 细胞杂交技术的基础上，创建立 HYPERLINK /view/346550.htm \t _blank 杂交瘤技术，这也开启了人类运用单克隆抗体治疗疾病的新篇章。通过把在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合，形成既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性，又具有 HYPERLINK /view/66869.htm \t _blank 抗体形成细胞的合成和分泌 HYPERLINK /view/552529.htm \t _blank 特异性抗体的特点的单细胞系，即成为单克隆抗体（monoclonal antibody）。 单克隆抗体产生以来，由于鼠源抗体具有难以克服的非人体组织免疫性问题，生物科技研究人员不断进行试验创新，相继找到了制作鼠／人嵌合型（Chimeric）抗体、人源化（Humanized）单抗以及完全人源化（Fully human)单抗的方法。这些努力，使单克隆抗体逐渐突破了非人源化的限制，实现了可完全人源化抗体的目标，生产出了如Atumumab和Adalimumab等完全人源化的100%的人类抗体。 在治疗癌症和其他免疫性疾病方面，单克隆抗体具有特殊的优势。例如在中国，中晚期癌症患者大多采用放疗和化疗的治疗手段，在治疗过程中，好细胞将随坏细胞一起被杀死，造成了患者的痛苦，也无法达到治愈疾病的目的。若使用单抗药物，则可充分利用其灵敏度高、特异性强、高效、血清交叉反应少或无、制备成本低等优点，既减少患者痛苦，又可提高治愈率。因此，单克隆抗体药物被称为医学里程碑药物。 目前，单克隆抗体主要用于诊断各类疾病，其药物制备技术也日益完善。截止2010年，全球已有500余种诊断和治疗用地单克隆抗体投放市场，100多种用于临床研究，20多种用于临床试验和治疗。截至2015年，单抗的全球市场价值将接近万亿美元，是全球药品市场最繁荣和最有希望的领域。 4.2　抗体工程 20世纪90年代初，分子生物学的发展使克隆抗体分子（Winter and Milstein,1991）的基因成为可能，并使单抗的基因也能够克隆到真核表达载体中。这样，任何重组单抗都可以以重建的方式从多样化细胞系（Chames and Baty,2000）中得到，解决了杂交瘤细胞系生产的许多不稳定性问题。修改克隆抗体基因的第一步是进行亚克隆随机或定向诱变和分子进化程序，能够在将来优化重组抗体，这也迎来了抗体工程（Hoogenboom and Chames,2000）的新时代。现有四个主要的治疗性单克隆抗体类型： l）鼠源型（第一代） 小鼠抗体由100%小鼠蛋白质组成。小鼠单抗的医疗应用受到限制，主要原因有副作用大、血清半衰期较短、不稳定性及易引发人体免疫反应而降低疗效等。这些影响的核心是过敏样HAMA反应。在这种反应中，鼠抗体被人的免疫系统作为抗原而识别。因此，人的免疫系统会产生针对鼠抗体的抗体而抵抗它。 2）鼠／人嵌合型（第二代） 嵌合型抗体是由小鼠抗体和人类抗体通过基因工程而重组的。在嵌合型抗体中，抗体可变区域（即抗原结合区（Fv））的鼠蛋白质成分被部分取代，鼠蛋白质成分通常占总蛋白的33%，鼠抗体不变区域（FC）的67%被人类抗体不变区域所取代。嵌合抗体旨在尽量减少由鼠成份引起的HAMA抗原反应，同时保持较高的特异性。然而，尽管免疫原性配置减少，嵌合型抗体如：Centocor/JNJs Remicade（infliximab）等仍然可以触发HACA反应，从而降低了抗体的功效。 3）人源化（第三代） 在抗体的可变区，有构成抗原结合位点的高变区域。为了对付HAMA 反应和HACA 反应，利用基因工程将鼠抗体的高变区替换为人的相关部分来创造人源化抗体。这使鼠的成分减少到5~10%。临床试验表明，这种类型的抗体很少或没有免疫原性反应。 4）完全人源化（第四代） 为进一步消除免疫原性的风险，亚乐生物科技研究院已经研制出含100 %人类蛋白的完全人源化抗体。高通量完全人源化单抗药物开发技术以噬菌体文库展示技术为核心，分别建立了多层次细胞表达纯