匹鲁卡品癫痫模型及戊四氮点燃模型新生鼠行为学和组织学的对比研.docVIP

　　匹鲁卡品癫痫模型及戊四氮点燃模型新生鼠行为学和组织学的对比研 作者：刘洪付 李晓 刘晓冉 王华 王利民 【摘要】 目的 比较匹鲁卡品（毛果芸香碱）点燃新生鼠痫性发作模型及戊四氮点燃模型的行为学特征及组织学改变,为实验模型的选择奠定基础。方法 选择SD新生大鼠为研究对象,制作两种不同的新生鼠癫痫模型,观察新生鼠的行为学表现、不同时点Nissl染色等组织学改变。结果 两种模型的行为学特征有所不同，匹鲁卡品点燃模型中未见神经元丢失及苔藓出芽现象，戊四氮癫痫持续状态模型中无神经元丢失，但明显出现苔藓纤维出芽现象。结论 腹腔注射匹鲁卡品小鼠模型是一种理想的颞叶癫痫动物模型，苔藓纤维出芽可作为判断癫痫持续状态模型是否成功的形态学标准。 【关键词】 癫痫模型；新生鼠；匹鲁卡品；苔藓纤维出芽 【Abstract】 Objective Comparison study of behavioral and histological changes betodel and pentylenetetrazole kindling model in the neonatal rat，to lay the foundation of the experiment model selection.Methods SD neonate rats odels ade to observe the behavioral changes and Nissl staining changes at different time points.Results Todels have their characteristic behavioral changes.No neuron loss and mossy fiber sprouting odel. No neuron loss ossy fiber sprouting in pentylenetetrazole statural epilepsy model.Conclusion Pilocarpine induced status epilepticus mouse model is an ideal temporal epilepsy model, and the mossy fiber sprouting is a typical morphological character for evaluating the SE model. 【Key odels,neonatal rat , pilocarpine，mossy fiber sprouting 癫痫动物模型在癫痫的病因学、发病机制、药理学等研究中占重要地位。神经元丢失及苔藓纤维出芽是癫痫产生过程中较常见的组织病理学变化。匹鲁卡品（毛果芸香碱）致癫模型及戊四氮点燃模型均是临床常用的新生鼠癫痫动物模型,两种模型各有不同特点,采用不同的模型可能会有不同的试验结果。目前的试验研究大都选择单一致癫模型，缺少对两种模型癫痫发作过程的对比性研究，本研究分别制作两种癫痫模型，同步观察两种模型不同的行为学特征和组织学改变,并探讨神经元丢失及苔藓纤维出芽在癫痫发病中改变情况［1，2］。 1 材料与方法 1. 1 实验动物与试剂 实验动物为烟台绿叶制药公司动物中心提供, 生后1 d的SD大鼠60只，随机分为盐水对照组、匹鲁卡品组、戊四氮组,每组20只，分别标记并与母鼠同笼喂养。匹鲁卡品、东莨菪碱、戊四氮均为Sigma公司产品。 1. 2 癫痫模型的制作 匹鲁卡品组：先予东莨菪碱1 mg/kg腹腔注射，以拮抗外周胆碱能反应，30 min后腹腔注射10%匹鲁卡品350 mg/kg，若注射匹鲁卡品后30 min无惊厥发作,再按每次10 mg/kg 追加匹鲁卡品。若惊厥发作持续30 min 仍未停止,则给予水合氯醛400 mg/kg 腹腔注射,及时中止发作［3］。戊四氮组:首次腹腔注射惊厥阈下剂量戊四氮40 mg/kg , 10 min后注射20 mg/kg , 以后每10分钟注射10 mg/kg,直至出现6、7级抽搐发作。急性期诱发发作后,每天早7点到晚8点逐只观察动物有无自发性发作及动物的死亡情况［1］。对照组:给予生理盐水腹腔注射。 1. 3 Lado 幼鼠癫痫发作分级标准［4］ 0 级: 无发作;1 级:机械性咀嚼;2 级:连续性点头;3 级:单侧前肢阵挛;3.5级:前肢交替阵挛;4 级:双侧前肢阵挛、后退;5 级:双侧前肢阵挛、后退、摔倒;6 级:狂奔嘶叫;7 级:强直发作。 1. 4 病理学研究 将致痫并存活的各组新生大鼠分别于模型成功制作后1 d及45 d给予水合氯醛腹腔麻醉,灌流固定取脑,在海马部位做冠状连续冰冻切片,切片厚度20 μm，每隔