引进百合品种资源评价研讨.pdfVIP

高家翔 指导教师： 何承忠(副教授) 学位授予单位： 西南林学院 云南·昆明 ⅢlIJllllIlllIll IIflIllIJ IllrJllllIllfl ＼1807565 声 明 我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含他 果，也不包含为获得西南林学院或其它教育机构 ，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献 并表示了谢意。 繇鼽日期．型幽圣 关于论文使用授权说明 本人同意：西南林学院有权保留论文的复印件，可以采用影印、缩印或其 它复制手段保存论文；提交论文一年后，允许论文被查阅和借阅，学校可以公 布论文的全部或部分内容。 (保密的论文在解密后应遵守此规定) 日期：巡2≤：!乡 | 很少有较高观赏价值的商业品种问世。引进花卉育种技术先进的国家的优良百合 种质资源并对其评价鉴定，通过栽培品种种质资源多样性状况的了解和评比，可 以了解其优良品种遗传背景，各品种间的亲缘关系、生理差异，从而初步了解国 际现有观赏百合种质资源多样性状况，引进和补充新优良基因资源，为国内百合 新品种的研发工作建立基础和提供指导。 本研究对49个荷兰进口优良百合品种从株高，地径，叶宽，叶长等表型性 状进行了表型多样性评价，同时利用AFLP分子标记技术，对优良百合品种的遗 传多样性状况、亲缘关系以及育种背景进行了评价和分析，主要的研究结果如下： 1．通过对各百合品种的叶长、叶宽、叶长／叶宽、地径、株高5个表型性状的 变异系数分析、变异水平方差分析、主成分分析，表明49个百合品种在这些表 型性状上均存在着不同幅度的变异，且差异均达到显著水平，表型性状之间的差 异主要表现为高生长的变异，其次是叶片形状的不同。 2．以百合5个表型性状指数为参数，采用最大距离法进行百合49个品种的 聚类分析。结果表明，49个百合品种能够被所观测表型性状完全区分开，说明 所调查的表型性状能够反映出各品种间存在明显差异，且品种之间的遗传变异丰 富。在遗传距离的阈值为2．5时，49个百合品种被区分为2大类，第一大类为 29个品种，分为7个品种群，第二大类为20个品种，分为两个品种群 3．针对百合叶片中多糖、蛋白质以及色素类等物质含量较高的特点，采用改 引进百合品种资源评价研究 良的CTAB法和SDS法从百合叶片中提取DNA，并进行效果比较，筛选出适于 百合AFLP分析的基因组DNA最有效的提取方法。结果表明：在样品研磨过程 5mol／L Kac，重复冰无水乙醇沉淀，75％酒精多次洗涤，所提取百合的基因组DNA纯度 高、基本无降解，适于AFLP分析要求。 4．确定了百合AFLP分析过程中的最佳DNA模板浓度，最佳Mg+浓度， 最佳dNTP浓度，最佳Taq聚合酶浓度，最佳引物浓度，建立了适合百合AFLP 技术的最佳反应体系，完成了DNA的酶切和连接预扩增、选择性扩增等试验 晰、多态性高的引物，对48个不同品种百合样本进行了AFLP分析，都得到了 清晰的指纹图谱，并且表现出较好的多态性。6对引物共扩增出459个可统计 标记，其中多态性标记406个，多态带百分率为88．5％，平均每对引物扩增76．5 条带。多态性片段长度主要分布