兴奋下丘脑外侧区上调胃ghrelin的神经机制.pdfVIP

兴奋下丘脑外侧区上调胃 ghrelin 的神经机制 * 侯忠赤 苗艳颖 祝世功 北京大学医学部生理学与病理生理学系,北京,100083 E-mail:sgzhu@ 摘要:目的:探讨兴奋下丘脑影响胃组织 ghrelin 表达的神经机制。方法:采用核团微量注射谷 氨酸兴奋下丘脑外侧区(LH),应用 RT-PCR 和免疫组化方法检测大鼠胃组织中 ghrelin 的表达 变化，比较切断迷走神经或给与阿托品对上述变化的影响。结果: LH注射谷氨酸后 1h和 2h， 大鼠胃底 ghrelin mRNA 表达明显高于 LH 注射生理盐水对照组(P0.001 ，P0.01);切断胃迷 走神经后，兴奋下丘脑外侧区不能增强胃底 ghrelin mRNA 的表达，与假手术组比较差异显 著(P0.001 ，P0.01) 。预先皮下注射阿托品与切断迷走神经切断作用相似。蛋白水平观察结 果表明，兴奋 LH 区胃底 ghrelin 表达增多，明显高于对照组（P0.01 ），切断迷走神经明显 抑制 LH 注射谷氨酸引起的胃底 ghrelin 高表达。结论:兴奋下丘脑外侧区可通过迷走神经胆 碱能途径上调胃 ghrelin 及 ghrelin mRNA 表达。 关键词:下丘脑外侧区, ghrelin, 迷走神经切断术，谷氨酸，阿托品 1.引言 胃肠内泌激素对胃肠运动和分泌具有重要功能，本身的分泌受胃肠及神经内分泌等多种 因素调节。近年来，随着基因组学和蛋白组学技术和理论的发展，相继发现一些新的胃肠激 素。Ghrelin是1999年从胃组织中新发现的一个胃肠激素。由28个氨基酸组成，具有酰基修 饰，分子量3300。其受体为G蛋白偶联孤儿受体（GHS-R）[1] 。Ghrelin最早是从胃中分离提 取出来的，后来证明其在消化系统如胰腺，大肠和小肠[2,3]，以及其它系统如神经和内分泌 腺等广泛存在,但以胃组织含量最高,其分泌量占循环Ghrelin的70%[4]。有研究发现，将胃泌 酸部分切除后，循环中的Ghrelin浓度降低80%，而人在胃切除术后血浆Ghrelin浓度也有类 似程度的降低，这也充分说明循环中的Ghrelin大部分来源于胃肠 [5] 。积累资料表明，Ghrelin 具有很多生物学功能，除最早发现的促进生长激素释放，促进摄食和增加体重外，其参与循 环、消化、神经及能量平衡的调节。胃合成和分泌Ghrelin受局部和神经分泌调节，详细机 1 1 本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金（项目编号：20020001083 ）资助 1 [6] 制尚未阐明。文献报道，富含脂肪的或高糖食物抑制Ghrelin合成和分泌 ，高蛋白食物具 有刺激循环中Ghrelin升高的作用[7]。禁食可诱导Ghrelin分泌，而迷走神经切断术或注射阿 托品能够抑制禁食对Ghrelin分泌的作用[8]。说明迷走神经活动与胃合成和分泌Ghrelin密切 相关。下丘脑是机体内分泌调节高级中枢，调控食欲、能量平衡及胃肠内分泌功能。但下丘 脑对胃Ghrelin的合成和分泌调节机制尚不完全清楚。 2．材料与方法 2.1 主要试剂： 多克隆羊抗 Ghrelin 抗体购自 SANTA CRUZ 公司。Trizol 购自 GIBICO 公司,dNTP 购自 Clontech 公司,AMV 逆转录酶、Taq DNA 聚合酶、RNasin , Oligo(dT) 15 Primer 均购自 Promega 公司。PCR 引物由赛百盛公司合成。谷氨酸购自华美公司,谷氨酸及阿托品临用前 用生理盐水配制成所需浓