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动
植
物
细
胞
培
养
条
件
的
比
较
动植物细胞培养条件的比较
动植物细胞的培养是细胞工程中非常重要的环节,在培养动植物细胞的过程中,培养条件有相似之处,但也有各自特殊的地方。下面,先就培养条件的不同之处进行比较:
一、培养基
植物细胞培养基一般为合成培养基,多为固体培养基,成分主要有无机营养、碳源、维生素、植物生长物质和有机附加物等。
表1 植物培养基成分及作用
种类成分成分种类作用无机营养物大量元素:
C ,H,O ,N, P, K, Ca, S ,Mg1.成为结构物质的组分2.参与代谢3.维持生物电化学平衡4.影响器官建成微量元素:Fe, Mn ,Cu, Zn, B,Mo,Cl有机营养物有机碳源 蔗糖、果糖、葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、甘露醇、乳糖影响营养状况、细胞分化、渗透压有机氮源维生素:硫胺素、吡哆素、烟酸、泛酸钙、腺嘌呤、生物素、叶酸、Vc 以辅酶形式参与代谢,促进对组织的生长和分化,0.1-10mg/l肌醇促进糖类转化、维生素和激素的利用,促进胚状体和愈伤组织的生成50-100mg/l氨基酸:甘氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、半胱氨酸生物大分子的组分,缓冲作用和调节体内平衡,促进不定芽、不定胚的分化,1-3mg/l复合成分辅助作用生长调节物质生长素IAA:吲哚乙酸
IBA:吲哚丁酸
NAA:萘乙酸
2,4-D:2,4-二氯苯氧乙酸1.促进根的分化
2.促进愈伤组织生成
3.促进体细胞胚发生
4.与CTK结合影响形态建成
用量:0.1-10mg/l细胞分裂素KT:激动素 BAP:苄氨基嘌呤2iP:异戊烯腺嘌呤
zt :玉米素1.促进细胞分裂,茎的增殖
2.诱导芽的分化
3.与生长素结合影响形态建成 用量:0.1-10mg/l赤霉素
GA31.促细胞伸长生长
2.刺激体胚发育
3.影响形成层分化
4.对生长素和CTK有增效作用乙烯
1.果实成熟、组织老化
2.抑制体胚发生水(95%)溶剂
生命活动的基本成分其他成分琼脂琼脂并不是培养基必要的成分
对培养物起到支持作用
使用浓度0.6-1.0%。活性炭AC吸附剂
防止褐化
促进形态发生
类似土壤的效果
0.5-10g/ L
动物细胞培养基包括天然培养基和合成培养基,可为固态,也可为液态,成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等,此外,动物细胞培养还需要各种培养液。
表2 动物细胞培养基基本营养成分
成分种类分类作用
水三蒸水、超纯水C源葡萄糖
谷氨酰胺提供主要能源
合成其他物质的原料
氨基酸 12种必需氨基酸
非必需氨基酸蛋氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸、赖氨酸、组氨酸、酪氨酸、精氨酸、胱氨酸
甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸等蛋白质的基本组分谷氨酰胺促进各种氨基酸进入细胞膜、N源、C源维生素 水溶性维生素生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、比多醇、核黄素、硫胺素、 Vb12、Vc提供辅酶辅基脂溶性维生素血清补充无机离子钠供给形式:Nacl、NaHCO3、NaH2PO4、Na2HPO4维持渗透压和胞内外物质的转运氯 Nacl、Kcl 、Cacl2渗透压钾供给形式:Kcl镁供给形式:MgSO4促进贴壁钙供给形式:Cacl2维持细胞膜的坚固和渗透性;
保持神经和肌肉组织的正常兴奋性;
促进脱氢酶活性;
促进细胞粘附性磷供给形式:HPO42-、H2PO4-参与基本物质代谢;
合成ATP的组分;
维持酸碱平衡碳NaHCO3、CO2维持酸碱平衡微量元素Fe、Zn、Se、Cu、Mn、Mo等与有机化合物结合激素和生长调节因子 促进细胞生长、维持细胞功能、保持细胞的分化状态血清:原代培养或细胞生长状况不良时,是基本添加物(5-20%v:v)含有基本营养物质
含有生长调节因子和激素
含有促进贴壁的生长基质成分(纤维连接蛋白)
含有载体蛋白(白蛋白、转铁蛋白)
含有抗机械损害的非特异性保护物质
含有中和毒性物质(白蛋白)
提供蛋白酶抑制剂
提供良好的缓冲系统其他成分核酸降解物嘧啶、嘌呤抗氧化剂谷胱甘肽、抗坏血酸
二、营养要求
根据动植物细胞培养基的不同,我们可以看出,动植物细胞对培养基的营养要求有所不同。
植物细胞培养基根据无机盐成分可分为:
(1)富盐平衡培养基(MS、 LS、BL、BM):无机盐浓度高,离
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