近交系小耳猪复合异种骨移植局部TNFαIL6和IL8+mRNA表达的实验研究.pdfVIP

昆明医学院硕士论文 近交系小耳猪复合异种骨移植局部TNF-a,IL-6和IL-8 mRNA表达的实验研究’ 昆明医学院第二附属医院骨科 研究生 熊 刚 导 师 胡侦明 教授 劳汉昌 教授 张宝华 教授 摘 要 目的 观察不同抗原性近交系小耳猪松质骨载体与不同剂量小耳猪 BMP (sepBMP)复合，在异种骨移植局部TNF-a,IL-6和IL-8mRNA的表达 规律，探讨小耳猪异种复合骨的细胞免疫学特性。 方法 将近交系小耳猪松质骨制备成不同抗原性载体，并与小耳猪 BMP(sepBMP)复合，植入小鼠股部肌袋，于术后5天、10天和20天取材， 制备石蜡切片，采用 HE染色和核酸分子原位杂交的方法，对植骨局部进 行组织学观察，检测植骨局部TNF-a,IL-6和IL-8mRNA表达情况，通过 图象分析，确定TNF-a,IL-6和IL-8mRNA表达强度，分析不同抗原性松 质骨载体在植骨局部 TNF-a,IL-6和 IL-8mRNA的表达规律及不同剂量 sepBMP对TNF-a,IL-6和IL-8mRNA表达的影响。 结果 植骨术后5天、10天和20天，各组植骨局部均可检测到TNF-a,IL-6 和IL-8mRNA阳性表达，单纯载体组、载体与2mgsepBMP复合组、载体 与4mgsepBMP复合组三组中，均以新鲜松质骨载体组在术后不同时间点 表达最强，部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体组最弱 (P0.05)，而相应 各组部分脱抗原与完全脱抗原松质骨载体间均无显著性差异((P0.05)。新鲜 松质骨、部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体组均以未复合sepBMP组在 术后不同时间点TNF-a,IL-6和IL-8表达最强，复合2mgsepBMP及4mg sepBMP组较弱，P0.05。组织学观察:单纯植入载体组均未见软骨细胞， 新鲜松质骨载体复合sepBMP2mg、4mg组均有少许软骨细胞，且20天 基金项目:本课皿为国家自然科学基金资助项目(项目编号 昆明医学院硕士论文 比10天时稍有增多，部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体复合sepBMP组 均在 10天、20天时有软骨细胞、骨细胞、类骨组织、原始骨髓腔、骨髓 形成。 结论 部分脱抗原及完全脱抗原松质骨载体复合sepBMP呈现低免疫原性及 良好的骨诱导能力;TNF-a,IL-6和IL-8mRNA在异种骨移植局部多种细 胞内表达，提示TNF-a,IL-6和IL-8可能是植骨局部细胞免疫调节的重要 细胞因子;外源性 sepBMP在异种骨移植局部对TNF-a,IL-6和IL-8mRNA 表达有抑制作用 提示sepBMP在植骨局部有诱导成骨和免疫调节双重作 用。 关键词 小耳猪 骨形态发生蛋白 异种骨移植 细胞因子 原位杂交 昆明医学院硕士论文 Theexpressionoftumornecrosisfactoralpha，interleukin6 andinterleukin8inimplantedcombinedheterologousboneof imbredlinesmall-earpig DepartmentofOrthopaedics,theSecondAffiliatedHospitalofKunmingMedical College Masterstudent XiongGang Supervisor ProfessorHuZhenmi