托品对乙酰胆碱的竞争性拮抗作用及PA2值测定试验-中国试剂网.PDF

中国试剂网 4.2.3.17 托品对乙酰胆碱的竞争性拮抗作用及PA2 值测定 实验目的 1．掌握PA2 值的测定方法及其意义 2 ．观察阿托品对乙酰胆碱的竞争性拮抗作用 教学时数 2 学时 实验原理 1、 激动药与拮抗药 （1）激动药(agonist)：与受体有亲和力又有内在活性药物。 完全激动药(fullagonist):α=1 部分激动药(partialagonist,mixedagonist): 与受体有亲和力，但内在活性较弱 （α1 ）的药物。 （2 ）拮抗药(antagonist)：与受体有亲和力，而无内在活性的药物 （α=0 ）。 ①竞争性拮抗药(competitiveantagonist)与激动药竞争同一受体的拮抗药。 激动药的量效反应曲线可以被竞争性拮抗药平行右移。如果增加竞争性激动药浓 度，仍可达到Emax 。 ②非竞争性拮抗药 （noncompetitiveantagonist ）与激动剂作用于同一受体，结合 牢固，分解慢或是不可逆的，或作用于相互关联的不同受体。 2 、PA2 值 PA2 是一种用以表示竞争性拮抗剂作用强度的指标，其意义是能使激 动剂提高到原来的2 倍时，可产生与原来浓度相同效应所需的拮抗剂克分子浓度 的负对数(log(B)) 。PA2 的值越大说明拮抗剂的作用越强。pA2 是拮抗参数 (antagonismparameter) ：当有一定浓度的拮抗药存在时，激动剂增加2 倍时才能 达到原来效应，此时拮抗药的负对数即拮抗参数， pA2=log[I]=logKI 3、药物作用 乙酰胆碱作用于豚鼠回肠的M 受体，引起肠肌收缩，当加入M 受体拮抗剂阿托 品后，若提高乙酰胆碱浓度，仍能达到未加拮抗剂前的最大反应，并可使剂量反 应曲线平行右移，则表明阿托品对乙酰胆碱呈竞争性拮抗。 实验材料 1．动物：豚鼠 中国试剂网 4.2.3.17 2 ．器材：RM6240 多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586 计算机、张力传 感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L ”型通气钩、高位吊瓶、量筒、烧 杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、 台式营养器。 3 ．药物：①3 ×104MAtropine ②3X106—3X102MAch 实验方法 一、首先调试RM6240 系统，使进入肌张力测定状态． 1 ．在主菜单中用鼠标选择 实验 中的 消化 ，选择系统显示 平滑肌生理 特性 。 2 ．在界面右侧控制参数区选择 张力, 〈选择3g〉,扫描速度1.0s/div,确定信号输 入，选择 〈通道2 〉，在工具菜单选择快速归零 （空载时钩上无任何东西）。 3 ．在主菜单中选择 〈示波〉，进入示波状态。 4 ．在主菜单中工具栏选择 〈网格切换〉对背景网格进行切换为细格，并在 选项中选择波形颜色红色。 此时肌张力测试调试完毕。 二、调节仪器：麦氏浴槽中加50ml 台氏液，调节温度38℃±0 ．5℃ 氧气23 个气泡／秒，并制备豚鼠回肠标本。 三、正式实验： 将肠管标本两端用缝衣针各穿一线，一端打一空结(约lcm 小套) ，另一端穿上长 线打结，用眼科镊钳住空结固定于通气钩上，放入麦氏浴槽中，将另端长线的尽 端打一空结，挂在张力换能器的小钩上，调节换能器高度，使前负荷为1g(可从 标尺上看出来) ，稳定标本20 分钟。 在主菜单下按键选择 〈记录状态〉，先描记一段正常曲线，然后按下列顺序给药。 向麦氏浴槽中加入3X103 M Ach0 ．1ml，观察曲线变化，检查肠管是否 有兴奋作用，然后冲洗肠管，使其恢复至正常。 按表格所给的剂量累积加乙酰胆碱，制作乙酰胆碱的累积量效曲线。具体作 法：先加小剂量Ach ，若有反应则当反应达最高峰时立即加下一剂量Ach ，在每 加一次药时都需用标记，只标加药序号，不打药名，直至曲线上升至最高峰不再 中国试剂网