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SOP SDS-PAGE银染标准操作规程
题目: SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳银染实验流程
目的:为了使员工迅速掌握SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳银染实验而编写的操作过程。
范围:成员
负责部门:QC Quality Assurance Department
姓名 签字 日期
起草人:
批准人:
QA:
生效日期:
概要
1.1 本操作流程用来描述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳银染的
4.1.1 SDS丙烯酰胺凝胶电泳所需的溶液见SOP-QC-100 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳实验流程
μl甲醛(100ml)
4.1.3 漂洗液 35%乙醇的水溶液
4.1.4 致敏液 0.02%硫代硫酸钠的水溶液
4.1.5 银染液 0.2%硝酸银的水溶液
4.1.6 显色液 6g碳酸钠,50μl甲醛,2ml致敏液,加水定容到100ml
4.1.7 终止液 38ml甲醇,12ml乙酸,加水定容到100ml
4.1.8 保存液 1%乙酸的水溶液
4.1.9 分子量标准
蛋白标准分子量参照物使用Fermentas公司的PageRuler(10KD~170KD)
4.1.10 蛋白样品
待分离的蛋白样品可为纯化的蛋白,也可为细胞裂解液。
4.2 设备:
4.2.1 蛋白电泳仪 公司 BIO-RAD 电源型号 PowerPac Universal
4.2.2 单道可调式移液器 公司 Eppendorf
4.2.3电子天平 公司 Acculab
4.3 耗材:
吸头(T-20,T-200,T-1000,T-5000)
烧杯( 50mL,三个)
Eppendof离心管
5.1 SOP-PUB-EQU-009 PH计()
5.2 SOP-PUB-EQU-010 Acculab电子天平 操作、清洁与校准
5.3 SOP-PUB-EQU-013 单道可调式移液器(Thermo/Gilson)的操作、清洁与校准SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳实验流程
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳实验流程
6.3.1试剂归于原位,清场。
7. 注意事项
7.1 丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收,其作用具有累积性。称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能含有少量未聚合材料。
标准操作规程
文件号: QC-SOP-102 Page 2 of 4
Version: A/0 Print Date:
Confidential, property of , DO NOT COPY
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