第7讲性别控制技术.pptVIP

华中农业大学动物科技学院 第7讲 性别控制 一、性别控制定义 人为干预并按人们的愿望使雌性动物繁殖出所需性别后代的一种繁殖新技术。 一、家畜性别控制的意义 制种：可增强良种选种中的强度和提高育种效率,以获得最大的遗传进展. 商品生产：乳用，肉用，公畜速度快5% 濒危动物扩繁、生物灭鼠 可使受性别限制的生产性状(如泌乳性状)和受性别影响的生产性状(如肉用,毛用性状等)能获得更大的经济效益. 动物模型与宠物 性别控制的意义 计划生育：一男一女 对人类来说,通过精子性别的选择,可以避免怀孕一个与X相关隐性遗传疾病的婴儿.而与X相关的隐性疾病至今已有370多种. 性别控制对于平衡一个家庭后代的性比例也将起到积极的作用,从而可以控制人口的增长. 二、哺乳动物性别决定机理 性染色体、性腺、性体特征 X、Y染色体 = 雄性？ 睾丸决定因子（SRY）：1990，英国，HMG蛋白 DMRT1、SOX9、SF-1、WT-1、LIM1、LHX9 性别决定示意图 三、性别控制方法 精子性别控制：H-Y抗原；精子体外培养 营养代谢与生殖生理调控，镉与性别控制 转基因性别控制 胚胎性别鉴定 精子分离成功的标准 准确性高：XY精子分离的准确率》75％以上。且分离后精子所生产的胚胎或后代的性别必须与期望值相符 ； 效率高：单位时间内所获得的X/Y精子数量大； 受精率正常：所分离的精子能与卵子正常受精； 具重复性：重复试验需得到相类似的结果。 精子分离的方法 白蛋白梯度游动分离法（ Ericsson,1973） 表面抗原免疫分离法（Zavos,1987;Blecher,1999） 自由电泳分离法 (Kaneko et al.,1984) 离心沉积分离法（Kaneko et al.，1984） 精子体积差异分离法（Van Munster et al.，1999） 遗传学分离法（Herman et al.，1999） 流式细胞仪分离法 （Johnson et al.，1989） 流式细胞仪检索分离法 1．分离精子的理论基础 2．精子分离效率 3．精子分离速度 4．精子分离在人临床上的应用 5．精子分离在畜牧业上的应用 6．精子分离存在问题及应用前景 分离精子的理论基础 精子为单倍体,29条常染色体和1条性染色体。 X精子携带X性染色体，与卵子受精后产生雌性后代； Y精子携带Y性染色体，与卵子受精后产生雄性后代。 DNA CONTENT OF X AND Y SPERM HUMAN 2.9% RABBIT 3.0% SWINE 3.6% CATTLE 3.8% HORSE 4.1% SHEEP 4.2% TURKEY 0% 精子分离理论基础小结 X和Y精子DNA含量存在差异（XY）; 荧光染料HOECHST 33342 着色差异; 激光照射后荧光信号差异--X强于Y; 荧光信号通过分离仪信息芯片处理； 含X/Y精子的液滴通过高压磁场处理； 携带不同电荷的液滴在电场作用力的引导下，落入左右两旁的收集容器中，X精子和Y精子得以分离。 分离精子研究进展 首次成功 1989 初期研究 1989-1998 中期研究 1999-2001 生产应用 2000年 英国 精子分离效率 精子分离过程中各个步骤的效率 Ⅰ 染色的精子样本(100%) （粘附试管及校正喷嘴等而丢失的精子22％） Ⅱ 真正用于分析的精子 (78%) （定向不正确，信号重叠等而丢失的精子43％） Ⅲ 真正可以进行分离的精子 (35%) （因分离纯度的需要， XY精子信号重叠 而丢弃的精子5％） Ⅳ 最终分离得到的精子 (30%) 精子分离速度 92-97 200-300个/秒 98-00 1000-2000个/秒 2001年 3000-5000个/秒 准确率 ～90% 精子分离准确率的测定 荧光原位杂交法（FISH） 数量PCR反应分析法 仪器精子重分析法 IVF胚胎性别鉴定法 后代性别鉴定法 用流动细胞检索仪重新分析已 分离猪和牛精子的纯度 ______________________________________________ 动物 分离 X % X % Y % Y % 次数 (范围) (平均) (范围) (平均) ______________________________________________ 猪 8 88-97 94 87-95 92 猪 4 96-98 97 93-95 94 牛 7 85-95 90 85-96 92 ________