超氧化物歧化酶(SOD) 活性测定超氧化物歧化酶(SOD) 活性测定.ppt

超氧化物歧化酶(SOD) 活性测定;一、意义：;;;二、目的要求：;三、原理：;三、原理：;四、仪器设备;五、试剂配制;六、植物材料:;七、操作步骤; 2.SOD活性测定： 取6支试管, 编号, 按下表加入试剂。将1号管用黑纸袋套上, 与其它试管一起放荧光灯下, 光强3000Lx照光10min, 到时间后关灯, 用黑布罩上试管(如室内光线不强, 不罩黑布也可), 以1号试管溶液为参比, 测定样品在560nm处的吸光度。不加酶的2号试管溶液颜色最深; 加入酶的由于SOD抑制了硝基四唑蓝的光还原,颜色变浅。 ?;2、活性测定： 取6支干燥的、玻璃质量一致的普通试管，按下表顺序加入试剂; 式中：Ack为2号对照管溶液在560nm处的吸光度值; AE为样品测定管溶液在560nm处的吸光值; V为酶液总体积（ml)； W为提取酶液的植物材料的鲜重（g)； Vt为测定时酶液的用量(ml)。 ; 九、注意事项: 1.所???试管的玻璃质量要一样。包括厚度、直径、质量等。 2.照光条件要一致。照光时试管放的高度、背景等。 3.要多做对照消除日光灯管的光质差异。 4. 植物组织中的酚类物质对测定有干扰，对酚类含量高的材料提取酶液时可加入聚乙烯吡咯烷酮消除。 5.结果计算时要用相邻对照管代入公式计算。; 十、思考题: 1.在SOD活性测定中为什么设照光和暗中两个对照管。 2.影响本实验准确性的主要因素是什么？应如何克服？;1.下次实验：改良半叶法测定植物光合速率 2. 请按《植物生理生化实验B》补充材料认真书写预习报告！ 3. 实验适宜时间：晴天上午8~9点开始。 具体时间要看气候，如果本周日晴天，就先测定光合速率，“叶绿体色素定量测定”可以调到下周上。请转告今晚请假的同学。 柯2011.5.6