细胞信号转导研究技术.docxVIP

细胞生物学实验方法与原理细胞信号转导研究技术细胞将外源和内源性变化转化成特定的信号并逐级传递，最终作出相应的反应，这是个非常复杂且极为精细的调控过程一，它伴随着配体与受体结合、蛋白质的结构与活性改变以及各种基因表达的变化等。这一过程依赖的分子组成的信号转导链称为“信号转导通路”，细胞中不同的信号转导通路交互作用、互相调控形成一个动态的信号转导网络。随着生命科学的发展，新的信号调节分子和信号转导机制不断被揭示，对信号转导网络的理解和绘制也逐步清晰。细胞通过位于胞膜或胞内的受体感受胞外信息分子的刺激，经复杂的细胞内信号转导系统的转换来影响细胞的生物学功能，这一过程称为细胞信号转导细胞信号转导配体检测可溶性配体检测方法?ELISA：培养上清、血液、体液?PCR：组织?Western；组织、上清等?质谱：组织、上清?流式细胞术：胞内?免疫荧光：组织、胞内膜型配体检测方法?PCR?Western?质谱?流式细胞术?免疫荧光细胞信号转导受体检测：定量实时定量PCR技术（real‐time PCR）?是在反应过程中实时检测与测量DNA扩增产物的技术。?最常用的Sybr green法是PCR反应中的SYBR Green荧光染料结合所有的双链DNA产物，每循环测量一次，荧光强度反应目的基因扩增产物的量。受体检测：定量蛋白质印迹（Western Blot）受体检测：定位免疫组化与免疫荧光技术用对应受体