腺伴随病毒携带NT3基因转导入耳蜗对豚鼠听功能及毛细胞的保护作用研究.pdfVIP

摘 要 论文题目:腺伴随病毒携带NT-3基因转导入耳蜗对豚鼠 听功能及毛细胞的保护作用 专 业:耳鼻咽喉科学 硕 士 生:姚小宝 指导教师:朱宏亮 教授 李胜利 副研究员 摘 要 目的感音神经性聋是由不可逆的听神经元损伤和感觉毛细胞丧失 所致.听觉信号是由听觉感受器一corti器上的毛细胞经螺旋神经节神 经元传递到大脑而形成的，无论是毛细胞还是螺旋神经节神经元的损伤 或减少都会引起听觉损害，而且这种听觉障碍往往是永久性的.近年来 发现鸟类基底乳头和哺乳动物的前庭感觉毛细胞具有再生能力，为耳聋 的防治带来了新的曙光，人们可望通过再生和修复方式取代损失的听觉 毛细胞达到治疗 目的。随着基因治疗技术及神经生物学的发展，内耳疾 病的基因治疗已成为听力学家们极为关注的领域。由于耳蜗骨性结构及 血一迷路屏障的存在，使耳蜗成为一个相对封闭的微环境，内耳解剖学和 相关免疫学表明耳蜗组织细胞可能是体内摹因转移的一个良好的 “靶细 胞’，。种种研究证实神经营养因子是外周听觉系统听觉上皮、听神经元细 胞发育、成熟、增殖分化和存活的必须因子，而且对损伤后的修复、残 存神经元的存活和功能可塑性起重要作用。外源性神经营养因子对耳毒 性药物及噪声引起的听力损害的保护和治疗作用己在多项研究中得以证 实。因此将病毒载体携带神经营养因子治疗感音神经性聋应用于临床实 践具有光明的前景。而腺伴随病毒载体具有生物安全性好，免疫反应低， 携带的外源性基因可长期存在，稳定表达等优点，是基因治疗的新型理 想载体。但目前尚缺乏应用AAV载体转导NT-3基因到内耳能否促进受损 毛细胞修复和听功能恢复以及长期应用的安全性的研究。本研究采用微 摘 要 仅蜗尖有少许毛细胞残存。而B组动物耳蜗形态变化及OHC损失率与C 组也不相同，可见明显外毛细胞存活。(6)由各组OHC损失率可以发现A 组OHC损失率明显低于与B组动物手术耳以及C组 (P0.05),B组与C 组比较也有显著性差异 (PO.05). 结论 (1)腺伴随病毒载休可以有效的转导外源性基因到耳蜗，并且 无毒性病理的主要形态学表现，是比较安全的转基因载体。 (2)腺伴随病毒介导NT-3转基因治疗可以用于保护受氨基贰类 药物损害的听功能和耳蜗毛细胞。 (3)注射腺伴随病毒载体本身可能对实验动物听功能及毛细胞 造成正面影响，其原因有待进一步研究。 (4)在耳蜗转基因治疗中应严格遵循无菌原则，否则可能会导 致耳蜗内感染影响其形态和功能。 【关键 词】腺伴随病毒;NT-3;耳蜗;基因治疗; 感音神经性耳聋 【论文类型】应用基础 Absrtact Title: Protective EffectofAdeno-associated Virus Mediated Neurotrophin-3 on Cochlea of Gentamicin Induced MuteGuineaPig Major Otolaryngology Name: YaoXiaobao Signature rvisor: ZhuHongliang Signatu Supe LiShengli Signatur Abstract Objective:Auditoryneuronslesionsandsensoryhaircellslosscan causeirreversiblesensorineuraldeafnessandtinnitus.Butinpasttenyears, wefoundavianbasilarpapillaandmammalianvestibulars