二氧化碳培养箱原理、使用.ppt

HERAcell 150 二氧化碳培养箱 培养箱原理及分类 各种培养箱的特点 二氧化碳培养箱 培养箱的原理及分类 培养箱是培养微生物的主要设备，可用于细菌、细胞的培养繁殖 原理：应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的环境 如恒定的酸碱度（pH值：7.2~7.4）、稳定的温度（37℃）、较高的相对湿度（95%）、稳定的CO2水平（5%）等。 各种培养箱的特点 CO2培养箱—温度控制系统 水套式加热：是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定 优点：当遇到断电的时候，水套式系统就可以比较长时间的保持培养箱内的温度准确性和稳定性，有利于实验环境不太稳定（如经常断电）并需要保持长时间稳定的培养条件 气套式加热：通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，又叫六面直接加热 优点：具有加热快，温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点，特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养 保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素，因此精确可靠的温控系统是培养箱不可或缺的重要部分。 CO2培养箱—湿度控制系统 维持足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度（如在开关门后）才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。 大多数的CO2培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气，湿度蒸发面积越大，越容易达到最大相对饱和湿度并且开关门后的湿度恢复的时间越短。 CO2培养箱—CO2浓度控制系统 通过红外传感器（IR）或热导传感器（TC）进行测量。两种传感器都是准确的。 红外传感器系统包括一个红外发射器和一个传感器，当箱体内的CO2 吸收了发射器发射的部分红外线之后，传感器就可以检测出红外线的减少量，与箱体内CO2的水平相对应，从而可以得出箱体内CO2的浓度。 热导传感器：对箱内空气热导率进行连续测量,输入CO2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发生变化,这样就会产生一个与CO2浓度成正比的电信号 CO2培养箱—消毒灭菌系统 紫外消毒功能：紫外消毒能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比， 距离越远，消毒能力越差，具有局限性 设计过滤器，能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97% 的0.3 微米以上的颗粒， 由于受到过滤膜孔径的影响，无法去除病毒和一些微小细菌 高温消毒，能使箱内达到高温的环境从而杀死污染微生物，达到消毒灭菌目的 比较有效 高温干热消毒 高温湿热消毒 高温湿热由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，因此该法的灭菌效率比干热灭菌法高。原因如下： ①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低； ②湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热，加速提高温度； ③湿热的穿透力比干热大，使其深部也能达到灭菌温度 ④湿热消毒一般控制在90℃就能达到很彻底的消毒效果，整个消毒过程中培养箱内的所有附件都不用取出；干热消毒温度一般都在100℃以上，培养箱内的传感器等都要取出，等消毒结束再装上，这样即麻烦，附件又不能同时消毒，增加二次污染的几率。 CO2培养箱的注意事项 1.要做好使用前的准备工作 二氧化碳培养箱应由专人负责使用，操作盘上的任何开关和调节旋扭一旦固定后，不要随意扭动，以免影响箱内温度、二氧化碳浓度、湿度的波动，同时降低机器的灵敏度； 箱子的放置要水平，避免阳光直射和灰尘等，要保证仪器周围的气流循环，后部及侧面应留出5cm的空隙； 加装稳压电源保证电源电压波动不超过220V±10%； 所加入的水必须是蒸馏水或无离子水, 防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用, 经常检查箱内水是否足够。 使用前箱内应用消毒酒精或碘溶液彻底擦洗, 防止其他微生物污染, 导致实验失败。 所使用的二氧化碳必须是纯净的, 否则降低二氧化碳传感器的灵敏度和污染二氧化碳过滤装置 2. 正确充气延长二氧化碳传感器使用寿命 二氧化碳传感器正常反馈要求进气压为0.06MPa 。当箱内气压降低时, 二氧化碳传感器在低压刺激下有节奏地开闭, 向箱内慢慢充气, 当进气压达0.1MPa 时, 自动停止调节。如充气方法不当, 使进气压力增大, 当超过0.1MPa 甚至0.2MPa压力, 会损伤二氧化碳传感器 4. 二氧化碳培养箱零点飘移的监控和零点的调整 培养箱使用过程中，二氧化碳零点会发生自然飘移现象。 二氧化碳培养箱零点的调整的步骤（一般以空气为标准来校零，每半年进行一次）： (1) 把二氧化碳浓度设定值设为零，目的是不让钢瓶中二氧化碳进入箱内； (2) 打开所有的门5 min ，往水盆内加上水，关上所有的门，稳定12 h 以上； (3) 等温湿度充分稳定后，观察二氧化碳浓度显示值是否为零，若不为零，校正至零