植物组织培养 第十章 无病毒苗木培育.pptVIP

第十二章无病毒苗木培育 本章内容提要： 植物病毒危害与研究历史概况 脱毒培养的概念与意义 脱除病毒的原理与方法 脱病毒植株的检测与保存 一、植物病毒的危害与研究概况 1 植物病毒的分布 1.1 植物病毒的地理分布的不均匀性 1.2 在植物体内分布的不均匀性 病毒具有系统侵染的特点，杂除生长点外，的各个部位均有，有差异性，存在不均有分布。 2、植物病毒的危害 2.1 植物病毒的种类 已报道的植物病毒达500多种，且危害越来越严重。 核果类： 148 余种； 马铃薯： 30 余种； 苹 果： 30 余种； 柑 桔： 20 多种； 观赏植物：200 多种。 19世纪欧洲马铃薯晚疫病；1998年6月马铃薯病 毒在欧洲蔓延。 草莓病毒；柑橘衰退病；柑橘黄龙病。 2.2 病毒对植物外观状态的影响 花叶型： 也称花叶病。是由于叶绿体结团或退化引起。造成叶片上形成暗绿(正常)、亮绿(结团)和黄色(退化)区域。 环斑型：在叶片、果实或茎的表面形成单线圆纹或同心纹的环、全环或半环，以用连续屈曲状的环。常常和花叶同时发生。 畸形生长型 ：各种反常的生长。 芋的花叶病 变色型：叶片的局部或全部颜色改变。如褪绿、变黄、变橙、变红、变紫、变蓝绿等。郁金香碎裂病毒感染郁金香，使其花色由单色发生斑驳或纵向条点。 坏死与变质：某些细胞组织死亡或组织质地变软或变硬或木栓化。 芋的枯萎病 2.3 染病后对生长和经济性状的影响 影响植物的正常生理代谢，不利于生长发育，出现各种病症，如花叶，黄化。 因植物病毒导致的年均损失约600亿美元，仅次于真菌病害位列第二。 3 研究历史概况 1889年，印尼有人发现，患枯萎病的甘蔗放在50-520C的热水中保持30分钟，可去除枯萎病。 1936年，Kunkel报道患有桃黄萎病(yellow virus)的植株，在34-360C处理14天可失活。 1952年，法国morel通过培养茎尖培养获得第一株脱毒苗，1955年，获得马铃薯脱毒苗。 目前，很多农作物都已经获得了脱毒苗。 4 离体培养脱毒的概念与意义 4.1 概念： 是指通过植物组织培养技术，在离体的条件下，进行脱毒培养，从而获得无病毒再生植株的技术。 4.2 意义 现在离体培育无病毒苗(virus-free plant)已在生产中发挥重要作用。 可提高植物的生理状态，从而有效防病。 可对已退化了的优良品性作物进行复壮，从而提高产量和品质。 大蒜经组培脱毒后，蒜头可增产23.3%～114.3%，蒜薹增产58.3%～175.0%。 用脱毒草莓苗进行生产，可提高果实产量20% ~ 45%，果实可溶性固形物含量增加5.3%～15.3%。 二、植物脱毒原理与方法 1 原理： 病毒在植物体内的分布是不均匀的，在茎尖中呈梯度分布。在受侵染的植株中，顶端分生组织无病毒或含毒量极低。（具体见P 182 页） 组织的含毒量随与茎尖的距离加大而增加。 植物病毒自身不具有主动转移的能力。 植物细胞的分裂与病毒繁殖之间存在竞争。 适当高温可以钝化病毒活性（不能杀死病毒） 1、物理的方法 热处理（热疗）法：温汤浸渍法(木本)、热空气处理法(草本)。 原理：适当高温处理可钝化病毒。病毒衣壳蛋白分子结构不同，抗热能力不同。利用不同病毒受热力处理后衣壳蛋白变性，病毒活性丧失的原理进行热处理脱毒。此时病毒不能合成或合成很少，而破坏却增加，使寄主体内病毒含量不断降低。把握处理的部位、温度范围、时间。 应用：蔓性长春花、苹果、树莓、草莓、菊花、黄瓜、梨、康乃馨等已有报道或应用。 2、化学方法 采用某些化学物质，如生长调节剂、2-硫尿嘧啶，抗病毒制剂—virazole等。 3、生物学方法 3.1 茎尖组织培养脱毒法 原理：分生组织的细胞生长速度快，病毒在植物体内繁殖的速度相对较慢；而且病毒的传播是靠筛管组织进行转移，或通过细胞间连丝传递给其他细胞，因此病毒的传递扩散也受到一定限制。造成病毒在植物体内分布不均。 方法：茎尖大小与脱毒率成反比，与成活率成正比。 3.2 愈伤组织培养脱毒法 愈伤组织中某些细胞不带病毒，可能是细胞的分裂速度快于病毒的复制速度，而似的少数细胞无病毒，这样通过这些细胞来再生植株，以获得无病毒苗。 3.3 珠心胚培养脱毒 利用多胚性植物(如柑桔和芒果)的珠心胚培养脱除病毒，获得无病毒苗。因为珠心细胞与维管束系统无直接联系。 缺点：20-30%的变异率、童期较长。 3.4 花器官等培养脱毒 如草莓花药、香蕉花序轴、水仙的子房切片。已在马铃薯、大蒜