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免疫印迹法 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶免疫定位 （SDS） 电转移 　将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素膜上 酶免疫定位 　 * 四、间接法 此法是测定抗体最常用的方法,属非竞争结合试验。 基本原理:将抗原连接到固相载体上，样品中待测抗体与之结合成固相抗原-受检抗体复合物，再用酶标二抗(针对受检抗体的抗体，如羊抗人IgG抗体)与固相免疫复合物中的抗体结合，形成固相抗原-受检抗体-酶标二抗复合物，测定加底物后的显色程度，确定待测抗体含量。 * ①特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原。洗涤除去未结合抗原及杂质； ②加待测血清，血清中若有相应的抗体则与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤后，固相载体上仅剩下特异性抗体。其他免疫球蛋白及杂质不能与固相抗原结合被去除； ③加酶标抗免疫球蛋白（酶标抗抗体）与固相复合物中的抗体相结合。洗涤后，固相载体上的酶量与待测血清中特异性抗体的量相关。若欲测人对某种病原微生物的抗体，可用酶标记羊抗人IgG抗体； ④加入底物显色，颜色深浅代表样本中待测抗体量。 * 五、竞争法 方法和特点: ①酶标记抗原（抗体）与样品或标准品中的非标记抗原或抗体具有相同的与固相抗体（抗原）结合的能力；? ②测定管中加入待测样本与一定量酶标抗原（抗体）的混合溶液，使两者竞争性的与固相抗体（抗原）反应； ?③免疫反应后，结合于固相载体