HPLC外标法测定R-α-苯乙胺的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC外标法测定R-α-苯乙胺的含量 李玥 　　（天津中医药大学 天津 300451） 　　【摘要】 目的：建立一种有效测定R-alpha;-苯乙胺的含量的高效液相色谱法。方法：采用氰基柱（250mmtimes;4.6 mm，5mu;m）；流动相为缓冲盐溶液（0.15%三氟乙酸水溶液：0.1%三乙胺水溶液55：15）：甲醇（85：15）；等度洗脱，柱温为35 ℃；检测波长为258nm；体积流量为1.0mL/min；进样量为5mu;L。结果：R-alpha;-苯乙胺在0.7mg/ml～1.2mg/ml具有良好的线性关系（R=0.9999，n=6）。平均回收率为99.3%，RSD%=0.39，n=9；结论：本方法简便准确、重现性好，精密度高，可以用于测定R-alpha;-苯乙胺的含量。 　　【关键词】R-alpha;-苯乙胺；含量测定；HPLC 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）11-0310-02 　　R-alpha;-苯乙胺是最为常用的手性拆分剂之一，是制备手性化合物的重要原料。广泛应用在药物、食品、农药、材料、饲料等领域，但笔者在国内外文献及中国、日本、美国和欧洲药典均没有发现其含量测定方法，对其质量缺乏有效控制，故本文开发出一种快速简便有效的含量测定方法，为R-alpha;-苯乙胺的质量控制提供参考。 　　1.仪器与材料 　　Agilent 1260高效液相色谱仪系统，包括1260泵、1260进样控制器、G4212B 二极管阵列检测器、Agilent ChemStation工作站；CP225D 电子天平（赛多利斯公司）；Elix10 纯水系统（美国Millipore公司）；R-alpha;-苯乙胺对照品（美国sigma公司，批号128K7135V）；R-alpha;-苯乙胺（金坛市华阳科技有限公司，批；甲醇（色谱纯，美国MREDA公司）；三乙胺（色谱纯，美国MREDA公司）；三氟乙酸（色谱纯，美国MREDA公司）；超纯水（试验室自制）。 　　2.方法与结果 　　2.1 色谱条件及溶液配制 　　2.1.1色谱条件 色谱柱为氰基柱（月旭 XB-CN 250 mmtimes;4.6mm，5mu;m）；流动相为缓冲盐溶液（0.15%三氟乙酸水溶液：0.1%三乙胺水溶液55：15）：甲醇（85：15）等度洗脱，柱温为35℃；检测波长为258nm；体积流量为1.0mL/min。 　　2.1.2溶液配制 　　空白溶液：流动相。 　　供试品溶液：取R-alpha;-苯乙胺1.0g，精密称定，置于10ml量瓶中，使用流动相稀释至刻度，摇匀，再量取1.0ml，置于100ml量瓶中，使用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 　　对照品溶液：取R-alpha;-苯乙胺对照品1.0g，精密称定，置于10ml量瓶中，使用流动相稀释至刻度，摇匀，再量取1.0ml，置于100ml量瓶中，使用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.2 专属性试验 　　2.2.1空白试验 　　取流动相进样5mu;L，结果未检测到峰，无干扰。 　　2.2.2波长确定及主峰纯度试验 　　取对照品溶液进样5mu;L，通过二极管阵列检测器进行光谱扫描，发现R-alpha;-苯乙胺在258nm处有最大吸收波长。通过主峰纯度检测，纯度因子为999.265，在阈值限值内，说明主峰纯度符合规定，专属性良好。 　　2.3 线性关系试验 　　取R-alpha;-苯乙胺对照品1.0g，精密称定，置于10ml量瓶中，使用流动相稀释至刻度，摇匀，再分别量取1.2ml、1.1ml、1.0ml、0.9ml、0.8ml和0.7ml分别置于100ml量瓶中，使用流动相稀释至刻度，摇匀，即得线性120%、110%、100%、90%、80%和70%溶液，进样5mu;L，测定峰面积，以峰面积A对浓度C进行线性回归，A = 756755C+2384，R=0.9999，说明R-alpha;-苯乙胺在0.7mg/ml～1.2mg/ml具有良好的线性关系。 　　2.4 检测限与定量限试验 　　将线性100%进行逐级稀释，分别以信噪比(S/N) 3和10确定R-alpha;-苯乙胺的检测线和定量限，结果表明：R-alpha;-苯乙胺的检测限为15ng，定量限为50ng。 　　2.5 进样精密度试验 　　将线性100%进样6次。各杂质样品的精密度良好，峰面积RSD%为0.20%。 　　2.6 重复性试验 　　取R-alpha;-苯乙胺1.0g6份，精密称定，置于10ml量瓶中，使用流动相稀释至刻度，摇匀，再量取1.0ml，置于100ml量瓶中，使用流动