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碱性磷酸酶-PAS联合染色液.PDF
南京森贝伽生物科技有限公司
碱性磷酸酶-PAS 联合染色液
产品简介：
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称 ALP 或 AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于
哺乳动物组织内，其活性所需最适 pH 9.2～9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处（细胞
膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和
毛细血管动脉部之内皮。此酶还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、
中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。1946 年 McManus 最先使用高碘
酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖。过碘酸(高碘酸)是一种强氧化
剂，它能氧化糖类及有关物质中的 1,2-乙二醇基使之变为二醛，醛与 Schiff 试剂能结合成
一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好
高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化。
ALP-PAS 联合染色液不仅能够显示碱性磷酸酶活性位点和糖原等物质，亦能
区分二者。冰冻切片及石蜡切片均可。
产品组成：
编号
Storage
名称 6×50ml
试剂(A): ALP 孵育液 50ml 4℃ 避光
试剂(B): 硝酸钴溶液 50ml RT
试剂(C): ALP 硫化溶液 2×1ml RT 避光
试剂(D): 高碘酸溶液 50ml 4℃ 避光
试剂(E): Schiff 试剂 50ml 4℃ 避光
试剂(F): 亚硫酸溶液 50ml RT
试剂(G): ALP 对照液 10ml 4℃ 避光
使用说明书 1 份
自备材料：
1、 蒸馏水
2、 温箱或水浴锅
操作步骤：
1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水，冰冻切片直接入水。
南京森贝伽生物科技有限公司
2、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定 2～5min。
3、切片入 ALP 孵育液(阴性对照切片入 ALP 对照液) ， 置于 37℃温箱。冰冻切片孵育 5～
15min，石蜡切片孵育 2～12h。
4、 流水洗 2min 后入蒸馏水。
5、入硝酸钴溶液，置于 37℃温箱染色 5min。
6、流水洗 5min 后入蒸馏水。
7、上述过程中配制 ALP 硫化工作液，即取试剂(C)用蒸馏水稀释 50 倍, 即为 ALP 硫化工作
液，即配即用。切片入硫化工作液，孵育 2min。
8、流水洗 10min 后入蒸馏水。
9、入高碘酸溶液，室温氧化 2～5min。
10、蒸馏水换洗 3 次。
11、入 Schiff 试剂，置于 37℃温箱染色 10～30min。
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