影响牛羊卵巢卵母细胞体外成熟的因素研究.pdfVIP

繁殖技术 2005～2006年全国养羊生产与学术研讨会议论文集 153 上起着重要作用．而Yuahz与细胞信息系统的建立有着密切的究应用中的技术趋向 关系。朱新产等(2003)对小鼠的卵母细胞至早期囊胚各个阶段 mRNA差异显示技术在多种动物早期胚胎发育相关基因 的早期胚胎发育基因表达扩增子的条带谱型进行了研究。发现 的研究中已有了较为广泛的运用．取得了很多研究成果．使得人 扩增子条带随着早期胚胎发育的不同阶段而发生表达或消失． 们对动物早期胚胎发育的分子机制有了初步的了解和认识。但 表明早期胚胎发育阶段存在基因表达的瞬时多态变化。 是，在对早期胚胎基因表达的研究中人们已经认识到．对早期植 在牛早期胚胎发育基因研究中．Natale等(2000)用在体外 入前胚胎的基因表达研究，需要对基因表达的时空模式进行精 培养系统下(cSOFMaa)获得的牛l细胞至孵出囊胚各个时期的 确的定性和定量。对高等哺乳动物而言．要获得足够多的早期 胚胎进行了不同发育阶段基因表达变化的研究，研究中发现了 胚胎材料是不易的，而且对于像人类植入前胚胎或者是经特殊 一条从8～16细胞期至囊胚期重复出现的条带。同时也研究了 处理获得的哺乳动物胚胎(如转基因动物胚胎、同种或异种动物 a—amanitin对基因表达的影响．结果表明在体外培养中用口- 克隆胚胎等)．往往只能用比较少的乃至一个胚胎来进行基因表 anaanitin处理牛胚胎12小时能有效地阻断3H·尿苷掺入到囊 达的研究。因而。建立单个植入前胚胎的mRNA差异显示技术 胚期的mRNA中。Ponsulksili等(2002)在对获得的早期体内 (single embryodifferential preimplantation displaypolymerase 发育的牛胚胎的研究中发现．一些基因量的表达，如Galectin-3chain 和fibronectin在不同的时期表现出的丰度不同。这种表达量上 越来越受到研究者的关注和应用。 的差异．对内细胞团和滋养层细胞的形成以及早期胚胎的附植 具有重要性。 差异表达基因的可靠方法．它具有与多胚胎差异显示同样的可 在猪早期胚胎发育基因研究中．Chang等(2000)研究了猪 靠性。它不仅可以大大节省研究材料。使得对植入前胚胎发育 注射hCG后早期胚胎(1～8细胞期)mRNA表达的差异．结果 在多个精确时间段进行系统研究成为可能。而且由于克服了多 发现所获得的差异片段大多数是在注射hCG96h后(即4细胞 胚操作同步性差的问题．可以发现更多的瞬时表达基因或突变 期后)表达．这些片段序列经过分析包括猪旷生长因子、猪p生 和致畸基因．而这些基因对胚胎的发育又表现为至关重要，这样 长因子结合蛋白lI和猪胶质利尿钠受体基因等．而这些基因的 就大大提高了对植入前胚胎基因表达规律研究的精确性。目 表达与猪早期胚胎在体外培养时克服4细胞阻滞期后所反映出 前．单个植入前胚胎mRNA差异显示技术已在小鼠、兔和人的 的基因表达相一致。 早期胚胎发育基因表达的研究中得到了应用．与多胚相比．显示 在兔早期胚胎发育基因研究中．Kocrbcr等(1998)研究了 不同氧浓度对体外培养的兔囊胚期胚胎基囚表达的影响．结果 步优化。这一技术将在早期胚胎的细胞分化、胚胎千细胞以及胚 发现所获得的差异片段与马的NADH·辅酶Q氧化还原酶第1l