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精品论文 参考文献 头孢克肟相关物质的RP-HPLC方法建立分析 孙威 (辽宁省沈阳市骨科医院 110044) 【中图分类号】R97 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）18-0146-02 【摘要】 目的 对采用RP-HPLC法对头孢克肟相关物质进行检测分析的具体情况，为今后实验室工作提供参考。方法 色谱条件：C18柱，规格250mmtimes;4.6mm，10um；流动相为：PH值为7.0，浓度为0.1mol/L的醋酸铵缓冲液-乙腈(96︰4)，检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，柱温为35℃。在以上条件下对头孢克肟相关物质进行测定。结果 头孢克肟浓度在1754.9-88.3ug/L范围内时存在良好线性关系，r=0.9999，10小时内稳定性号良好，重现性良好。结论 采取RP-HPLC法检测头孢克肟相关物质含量时具有分析速度快，重现性好，能够将其作为对头孢克肟的含量以及相关物质的测定方法。 【关键词】 RP-HPLC 头孢克肟 相关物质 测定 临床上头孢克肟为第三代口服头孢菌素，该药物的抗菌谱广且杀菌效果十分显著，特别是对肺炎链球菌、淋球菌、产气杆菌、沙变形菌、雷菌属等存在较高的抗菌活性，体内分布相对较广，同时针对各种细菌形成的beta;-内酰胺酶稳定性良好，能够对大多数革兰阴性菌包括奈瑟球菌属、嗜血菌属、肠杆菌科等的大多数菌种进行有效的抑制，现阶段在临床上主要对耳鼻咽喉感染、呼吸道感染、胆囊炎、胆道炎、尿道感染等进行积极治疗[1]。本次研究中出于对对采用RP-HPLC法对头孢克肟相关物质进行检测分析的具体情况，为今后实验室工作提供参考的目的，在以上色谱条件下对不同批号的头孢克肟胶囊及其相关物质进行测定，并对测定结果进行了评价分析，现汇报如下。 1 仪器与试剂 本次研究中所用仪器包括：Waters1525高效液相色谱仪(配套柱恒温箱、自动进样器)；Empower色谱管理系统；Waters2487型紫外检测器；UV2401-PC型紫外分光光度计。所用试剂为：头孢克肟原料购自印度Orchid公司，批号分别为XMEP100119，XMEP100120，XMEP100121；头孢克肟对照品(纯度为85.2%)购自中国药品生物制品检定所；所用乙腈、甲醇等均为色谱纯；醋酸铵、H2O2均为分析纯；所用水均为去离子水通过Milli-Q plus纯水器予以处理[2]。 2 色谱条件 色谱条件：Hypersil BDS C18柱，规格250mmtimes;4.6mm，10um；流动相为：PH值为7.0，浓度为0.1mol/L的醋酸铵缓冲液-乙腈(96︰4)，检测波长为254nm，流速为1.0mL/min，进样量为10ul，柱温为35℃[3]。 3 方法与结果 3.1 线性范围 精密称取头孢克肟对照品适量，采用甲醇进行溶解，经流动相稀释配制成浓度分别为0.10、0.25、0.49、0.98、1.97、4.93、9.87、14.80、19.73、39.46、49.33 mu;g/mL的溶液，进样测定，对所得色谱图进行记录。 结果的线性方程为：A=16204C-30676,r=0.9999。并且发现头孢克肟浓度在1754.9-88.3ug/L范围内时存在良好线性关系。 3.2 精密度实验 精密量取有关物质项下的同一份供试品溶液，以以上所述色谱条件连续6次进样测定，结果得到：单个最大杂质峰面积的RSD为1.1% (n=6)，总杂质峰面积的RSD为1.2%(n=6)，这一结果显示出该方法的重复性理想。 3.3 供试品溶液的稳定性实验 精密量取有关物质项下的同一份供试品溶液，在室温条件下放置0、2、4、8、10小时后进行进样检测，结果发现，各杂质以及杂质总量未发生比较明显的变化。且最大单个杂质峰面积的RSD为1.2% (n=5)，总杂质峰面积的RSD 为1.2%(n=5)，结果显示出在室温供试品溶液放置10小时之内具有良好的稳定性。 3.4 准确度考察与供试品的测定 精称适量对照品，以甲醇为溶剂进行充分溶解，而后用流动相进行稀释，配制成每毫升含10ug的溶液作为对照品溶液。精称适量供试品，同样以甲醇为溶剂进行稀释，配制成每毫升含1mg的溶液作为供试品溶液，对照品溶液10ul进样，对检测灵敏度进行调节，使主成分色谱峰的峰高占满量程20%，而后分别取空白溶剂、对照品溶液、供试品溶液进行分别进样，对色谱图进行记录。以外标法通过峰面积对有关物质的含量进行计算，同时与2010年药典