果蝇培养麻醉及雌雄鉴别.PPT

实验四 果蝇培养、麻醉及雌雄鉴别 一 实验目的 　　通过实验掌握人工饲养果蝇的方法，了解果蝇的生活史，学会鉴别果蝇的雌雄，从而熟悉遗传学上广泛使用的材料，为以后运用果蝇进行遗传试验作好准备。 三 实验材料 果蝇 18＃野生型（5组）；22＃白眼（6－8组）；6＃短翅白眼；e＃黑檀体 四 实验仪器及用具 双筒解剖镜，广口瓶、解剖针、标签、天平，量筒、棉花、纱布、玻璃棒、电炉、烧杯 五 药品和试剂 琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母、乙酸、乙醚 六、实验步骤 1 培养瓶的准备： 　　 无色透明的广口瓶，用自来水洗净，倒置滤水备用。用棉花、外包纱布，做成与瓶口大小相等的棉塞， 气消毒。 2 果蝇培养基的配制： 　水　　琼脂　　蔗糖　　玉米粉　　丙酸　　 酵母　 100ml 1.2-1.5g　 10-13g 　 10 g　　 0.5 ml　 0.5 g 1）配制时先将1/2的水把琼脂放入烧杯中溶解。 2）用剩余1/2水将玉米粉调成糊状，加入烧杯中煮沸，最后加糖煮沸数分钟即可，滴入乙酸即可。 3）待培养基稍凉，每个广口瓶倒入10-30mL的培养基，冷却后加入少量酵母粉。 3　果蝇的麻醉： 将所需麻醉的果蝇引入一新瓶中，以乙醚作为麻醉剂（三滴左右），在其棉塞上滴上数滴乙醚，制成麻醉瓶。瓶内果蝇全部跌落不动时，即可进行观察。 5 　果蝇的雌雄鉴别： 　 将麻醉的果蝇置于载波片，在显微镜下（4倍或10倍）鉴别雌雄果蝇。 1）体型：雌果蝇体型较大，雄的较小。 2）腹部末端：雌果蝇腹部椭圆末端稍尖，雄果蝇末端钝圆。 3）腹部背面：雌果蝇有明显5条黑色条纹，雄果蝇的有3条，前2条细，后1条宽，延至腹面，肉眼可见腹部末端有一明显黑点。 4）腹部腹面：雌果蝇有较明显的6个腹片，雄果蝇有4个腹片。 5）性梳：雄果蝇第一节足底侧最上部附足前端表面有黑色鬃毛－性梳。 6 原种培养 1）先检查，看果蝇有没有混杂。 2）每瓶接种3-4对，空瓶在上面，自己会飞上去，再数数雌雄数目。 3） 贴上标签，注明品名，日期，培养人。 作业： 　　简述果蝇的雌雄区别。 观察到的性梳可以画下来。 * * 二 预备知识 　　果蝇是双翅目昆虫，具有生活史短，繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的经典好材料 。　　 果蝇的生活史：卵→幼虫→蛹→成虫，最适温度20－25℃。从卵到成虫约10天，在25 ℃时成虫约活15天。连续30 ℃以上的温度能使果蝇不孕或死亡。　　 卵：果蝇卵约长0.5毫米，外围是一层由细胞组成的六角形小格的包膜的卵壳，在背面的前端伸出一对触丝，使卵生产在柔软的食物不致下沉。　　 幼虫期：幼虫从卵中孵化出来要经过两次脱皮，所以幼 虫包括三个阶段（龄）。 蛹化：当幼虫准备准备化蛹时，它们从培养基中爬出来 附在较干燥的表面，果蝇在末龄幼虫的皮中化蛹， 　　　起初白、软，后渐色深、硬，最后发育成一个有 　　　成虫体型与器官的个体，这些转变完成以后，成 　　　体就从蛹壳的前端强挤出来。 　果　蝇　图　片 　雌蝇 　雄蝇 长　翅　果　蝇 短　翅　果　蝇 白眼 红　眼　果　蝇 雌雄果蝇图片