对353例痰标本XpertMTBRIF检测和固体培养的结果分析.docVIP

精品论文 参考文献 对353例痰标本XpertMTBRIF检测和固体培养的结果分析 　韦宣彤 　　（广西龙潭医院 广西 柳州 545005） 　　【摘要】 目的：了解XpertMTB/RIF检测技术对诊断肺结核和利福平耐药检测对临床的应用价值。方法：XpertMTB/RIF检测和改良罗氏培养法进行对比，XpertMTB/RIF检测和传统药敏试验对利福平耐药分析，对比敏感度和特异度。结果：XpertMTB/RIF检测阳性率60.9%，培养法阳性率49.9%，对NTM检测特异度100%，Xpert MTB/RIF对利福平耐药检测敏感度97.4%，特异性为96.5%。结论： XpertMTB/RIF检测技术对肺结核早期诊断及合理用药有很好作用，对NTM的诊断和NTM与MTB共患者的诊断有参考价，XpertMTB/RIF检测技术与固体培养方法结合更有利于临床的诊治。 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）04-212-02 　　结核病主要是通过呼吸道传播感染结核分枝???菌的疾病，结核病传染性强，病程长，而耐药性变异和HIV流行给临床诊治结核病增加了难题。我院是以结核病和艾滋病为两大病种为重点的专科医院，更快更准确地检测结核病可为临床诊断和治疗提供更好地帮助。XpertMTB/RIF检测技术是一种半巢式定量实时荧光PCR技术，该技术针对结核分枝杆菌的rpoB基因81bp的利福平耐药决定区序列设计引物、探针，进而可以检测是否发生突变，从而判断是否患结核以及是否对利福平耐药，标本处理及检测耗时不超过3小时，而传统的固体培养法很难达到，现通过对XpertMTB/RIF检测与改良罗氏培养法的结果对比，以了解XpertMTB/RIF检测技术实际应用价值。 　　1.材料与方法 　　1.1 资料 　　从2014年9月到2015年5月到我院门诊及住院疑似肺结核的病人。 　　1.2 标本 　　嘱咐患者晨起用清水漱口后，用力咳出肺部的痰液。一份做XpertMTB/RIF检测（简称Xpert检测），一份做结核菌培养及药敏试验。 　　1.3 仪器 　　Gene Xpert MTB/RIF检测系统、生物安全柜、低温冷冻离心机、涡旋振荡器、恒温培养箱。 　　1.4 试剂 　　Xpert MTB/RIF检测仪器及配套试剂（Sample Reagent液和反应盒）由美国Cepheid公司生产。培养前处理消化液（NALC-NaOH混合液），缓冲液，配制参照《结核病诊断实验室检验规程》[1]，罗氏培养基和药敏培养基由珠海贝索生物技术有限公司生产。 　　1.5 方法 　　1.5.1 Xpert检测 吸取痰标本1ml加入Sample Reagent痰标本处理液2ml，涡旋振荡10S，直至无可见块状痰标本存在，静置15min后，吸取2ml缓慢加入反应试剂盒内，将反应试剂盒放入Gene Xpert MTB/RIF检测仪内进行检测。 　　1.5.2分枝杆菌分离培养 吸取标本2～5ml和消化液1：2震荡混匀后静置15分钟（不超过20分钟），加入缓冲液至45ml，3500转/分离心，15分钟，弃上清液，再加入1ml缓冲液混匀后滴加到罗氏培养基。放入温箱孵育（温箱温度控制35～37℃），接种后第3天和第7天观察培养基情况，此后每周观察一次。 　　1.5.3药物敏感性试验 包含有菌种鉴定和利福平等8种药物，采用比例法对培养出来的分枝杆菌进行操作，操作方法按照《结核病诊断实验室检验规程》[2] 　　1.6 结果分析 　　排除诊断不明确的患者标本,利福平耐药表型试验结果不明确的病例,患者死亡或自主出院无法得到最终诊断的病例，最后共353例标本纳入统计。 　　2.结果 　　353例患者标本，以临床诊断为金标准，首先培养鉴定为非结核分枝杆菌13例,对应Xpert检测阴性,特异度100%。Xpert检测阳性率60.9%（215/353）,培养法阳性率49.9%(176/353)（见表1），配对设计四格表资料chi;2检验，P＝0.000lt;0.005,两方法比较具有统计学意义，Xpert MTB/RIF检测检出率明显高于培养法。而Xpert MTB/RIF对利福平耐药检测敏感度97.4%，特异性为96.5%（见表2）。Xpert MTB/RIF报告最早半天发报告，最迟4天（遇周末休息），而传统培养法药敏结果报告发出时间平均64天。 　　表1 Xpert MTB/RIF与培养法检测MTB分析 　　* 　　3.讨论 　　本研究中Xpert MTB/RIF阳性率60.9%高于罗氏培养法，Xpert MTB/RIF对利福平的检测敏感度97.4%，特异度96.5%