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第四章 制备色谱技术 第五节　超临界流体色谱法 Copyright ? 2012 Dalian Polytechnic University Song Jianguo 一、概述 二、SFC原理和仪器 三、SFC色谱柱 四、SFC条件选择 五、SFC应用 §4.5　超临界流体色谱法（SFC） 1. 概述 超临界流体色谱是用超临界流体作为流动相的色谱法。 1981年 Novotny和Lee首先报道了毛细管SFC，进而对SFC的理论、技术作了系统的研究，并有了商品化SFC仪器。 1962年 Klesper等人首次提出SFC的概念 SFC与HPLC的比较 比HPLC分离时间短；（SCF粘度低） 比HPLC更容易除去分离产物中的溶剂； 比HPLC柱效高；（SCF扩散系数大） 具有取代正相HPLC的潜力。（当与超临界流体提取方法 配合使用时，提取、浓缩及色谱分离可一次性完成） §4.5　超临界流体色谱法（SFC） 可适用于热不稳定化合物的分离。（SCF操作温度低） SFC与GC的比较 谱带展宽小；（SCF扩散系数与粘度介于气体和液体之间） 流动相的作用类似LC； （SCF密度大，不仅载带溶质移动，且与溶质产生作用力） 可对大分子、高聚物等难挥发性物质进行分离； （SCF操作温度低） §4.5　超临界流体色谱法（SFC） 2. 原理和仪器 （1）高压泵 一般采用注射泵，以输送无脉冲、小流量的流动相。 （2）进样系统 有外样品管的六通阀为标准进样方式 §4.5　超临界流体色谱法（SFC） （3）阻尼器（限流器） 作用：在柱出口保持一定压力，使SCF在色谱内始终保持 流体状态。 （4）检测器 几乎所有GC和LC的检测器都可用于SFC。 3. 色谱柱 （1）填充柱 流动相密度对保留值影响很大，故靠压力调节保留值。 填充柱压降大，超过临界压力20%时柱压降对SFC影响小。 §4.5　超临界流体色谱法（SFC） 4. SFC条件的选择 为了能经得住流动相的冲洗，所用固定相大多数都需交联固化，具有良好的化学稳定性和较高的选择性。 （2）毛细管柱 细内径：50μm，100μm SCF溶解力强，涂渍的固定相必须交联。 （1）固定相 §4.5　超临界流体色谱法（SFC） SFC常用固定相 30－250 强极性 SB-CYANOPROPYL-25 氰丙基苯基聚硅氧烷 30－260 极性 PEG-20M 交联聚乙二醇－20M 30－260 中极性 SB-BIPHENYL-30 联苯基甲基聚硅氧烷 100－280 中极性 SB-SMECTIC-50 液晶甲基聚硅氧烷 30－260 弱极性 SB-PHENYL-50, OV1701 苯基甲基聚硅氧烷 30－300 非极性 SE-30,SE-33, SE-54, OV-101,DB-1, SB-Methyl-100, SB-OCTYL-50, SB-PHENYL-5 甲基聚硅氧烷 使用温度范围 极性 商品型号 名称 §4.5　超临界流体色谱法（SFC） （2）流动相 CO2是SFC最常用的一种流动相，它的优点包括临界温度较 低、纯度高、价格低廉和安全性好。 超临界CO2的溶剂力与异丙醇和吡啶相当，可以分析大部分 非极性和中等极性的样品。 分析较强极性的物质时，可以在CO2流体中加入有机改性剂， 以增大超临界CO2的溶解度。苯、乙醇、乙烷、甲苯和甲醇 是常用的改性剂。 注：改性剂的加入常导致保留时间和选择性上的不重复。 §4.5　超临界流体色谱法（SFC） （3）压力和温度 在较低温度下与LC的保留行为相似，lgk值随压力的增加 而增加。 流动相的压力和密度在每一温度下都会影响保留值； 选择合适的密度程序可使多组分混合物得到最佳分离。 高于临界温度区（似GC区）增加压力，lgk值降低； 5. SFC的应用 SFC可用较GC低的分离温度，更强的溶剂力和通过改变操 作条件而得到更高的选择性。同LC相比，SFC又具有高得多的 总柱效和使用的更广泛的检测器种类。因此，作为GC和LC的 补充，SFC可以用于那些热不稳定物质、非挥发性高分子、生 物大分子、极性物质和手性化合物的分离检测。 第四章 制备色谱技术 第六节　制备气相色谱法 Copyright ? 2012 Dalian Polytechnic University Song Jianguo 一、仪器装置 二、色谱柱 三、操作 §4.6　制备气相色谱法（GC） 上个世纪50年代首次用气体作流动