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基因工程的原理和操作

知识回顾:杂交育种 1、原理 2、过程 3、优点 4、不足 基因重组 具有不同优良性状的亲本杂交获得F1, F1自交获得F2,鉴别、选择需要的类型。 可以把多个优良性状集于一个个体上 只能利用已有的基因重组,不能产生新 的基因;进程缓慢、过程繁琐、育种时 间长;不能克服远缘杂交不亲和的生殖 障碍。 水母 一、基因工程的原理 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 原理 意义 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 →拼接 →导入 →表达 定向地改造生物的遗传性状 基因重组 可按照人们意愿定向改变生物性状,培育新品种;克服远缘杂交不亲和的生殖障碍。 二、基因工程操作的工具 1.基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶 (限制酶) 例如:EcoRI限制酶 重播 黏性末端 黏性末端 二、基因操作的工具 1.基因的“剪刀”──限制性核酸内切酶 (限制酶) 作用特点: 作用部位: 结果: 分布: 专一性(特异性) 产生带有黏性末端或平末端的DNA片段 磷酸二酯键 原核生物 2、基因的针线──DNA连接酶 作用:形成磷酸二酯键,将两个末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 种类:T4DNA连接酶(黏性末端或平末端) E.coliDNA连接酶(黏性末端) DNA连接酶连接 DNA聚合酶和DNA连接酶的比较 DNA连接酶 DNA聚合酶 不同点 相同点 连接DNA片段 将游离的脱氧核苷酸连接到DNA片段上 连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖,形成磷酸二酯键 3、基因的运载体 常用的运载体: 质粒、噬菌体、动植物病毒 作为运载体必须具备哪些条件? 1.能在宿主细胞中稳定保存并大量复制。 2.具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。 3. 具有某些标记基因,便于进行筛选。 三、基因工程的操作步骤 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合 用同一种限制酶切割质粒与目的基因 3、将目的基因导入受体细胞(不进行碱基互补配对) 动物细胞:一般选用受精卵 植物细胞:受精卵或体细胞 微生物细胞:繁殖快、产物多 4、目的基因的检测与鉴定 根据标记基因判断目的基因是否导入, 受体细胞表现出特定性状,说明基因完成了表达 ⒈要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是( ) ①限制酶 ②DNA连接酶 ③解旋酶 ④还原酶    A.①② B.③④ C.①④ D.②③ 2.基因工程的正确操作步骤是( ) ①使目的基因与运载体结合   ②将目的基因导入受体细胞  ③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 ④提取目的基因 A. ③②④①   B. ②④①③      C. ④①②③    D. ③④①② 1、基因工程与作物育种 2、基因工程与药物研制 3、基因工程与环境保护 四、基因工程的应用 五、转基因生物和转基因食品的安全性 优点: 减少农药使用,减少环境污染;解决粮食短缺问题;节省生产成本;增加食物营养价值;增加食物种类 缺点: 可能产生新的毒素或新的过敏原;可能产生抗除草剂的杂草;可能会损害农作物的多样性;可能干扰生态系统的稳定性;可能使疾病散播跨越物种障碍。 1、基因工程的原理 2、基因工程的工具 3、基因工程的操作过程 4、基因工程的应用

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