纳豆激酶的发酵、纯化条件的优化及开发应用研究.pdfVIP

陛压料技大学 论文题目： 纳豆激酶的发酵、纯化条件的优化及开发应用 学科门类：工学 一级学科：食品科学与工程 培养单位：生命科学与工程学院 硕士生：王建 导师：李宏梁副教授 201 2年5月 IIII i1111111111I 799 By．WangJian． Thesis Professor Supervisor：Associate Li HQng：Li銎塾g May,2012 测。检测结果表明，纳豆呈淡黄色，具有纳豆特有的滋气味，粘性强、拉丝 合SB／T 10528．2009《纳豆》对纳豆指标的各项要求。 (2)NK固体发酵条件的研究。首先对影响NK活力的食盐加入量、 大豆初始含水量、大豆蒸煮时间、菌体接种量、发酵时间、发酵温度和后熟 时间等7个固体发酵条件进行了单因素实验，确定了每个因素的最佳值；其 次通过预备试验确定了影响NK活力的关键因素，即：大豆初始含水量，大 豆蒸煮时间，菌体接种量；并通过正交实验和验证实验，确定了最佳优化结 果，即大豆初始含水量为50％，大豆蒸煮时间45min，菌体接种量为10％。 (3)盐析法分离纯化NK的研究。采用硫酸铵作为盐析用盐，并绘制 盐析曲线，根据盐析曲线，选择30％的硫酸铵饱和度沉淀杂蛋白，选择70％ 的硫酸铵饱和度沉淀NK，得到盐析法分离纯化结果为：比活力达到508．1 IU／mg，纯化倍数为1．2l，回收率达到92％。 分子量为30KD的超滤膜，再将其透过液通过截留分子量为10KD的超滤膜， 收集中间分子量段的NK滤液；同时研究了操作压力、料液温度和料液pH 值等三个超滤工艺参数对膜通量和NK含量的影响，并通过单因素试验和正 交实验，得到了最佳优化结果，即操作压力为0．25Mpa，料液温度为37℃， 料液pH值为7．0。根据超滤工艺参数优化结果，得到超滤法分离纯化NK 结果为：比活力达到1052．4 IU／mg，纯化倍数为2．50，回收率达到81％，与 硫酸铵盐析法分离纯化NK相比较，虽回收率有所下降，但NK的纯化倍数 得到很大提高，且纯化步骤简单、纯化条件温和，减少了NK的损失。 (5)山楂速溶纳豆粉的研制。采用冷冻干燥法制备纳豆粉及纳豆激酶 楂粉、麦芽糊精、黄原胶等原辅料经过100目筛、混合、调配和包装等工艺 制得山楂速溶纳豆粉，在单因素实验的基础上，以感官评价为评分标准，采 用L9(34)正交实验和极差分析得到山楂速溶纳豆粉最佳配方及工艺条件为： 纳豆粉与山楂粉质量比为l：O．3，麦芽糊精添加量为20％，黄原胶添加量为 0．3％，冲调温度为60℃，此工艺条件下山楂果香浓郁、速溶性好且无分层 现象。 关键词：纳豆激酶，固体发酵，盐析法，超滤法，速溶性 n research main the as contentof articleincludes5 below． object．The aspects and