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- 2017-12-28 发布于江苏
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基因工程原理与技术-11
第十一章 动物基因工程;;二、目的基因的选择
①编码或调控机体生长发育或特殊形态表征的基因;
例如:生长激素基因、人生长激素释放因子基因
②增强抗病作用的基因及免疫调控因子基因;
例如:人类促衰变因子基因、鸡马立克氏病毒基因
③药用蛋白基因。
例如:组织纤溶酶原激活剂基因、乳铁蛋白基因
转基因的结构特征对其表达有较大的影响:
基因组DNA 微小基因 cDNA;三、表达载体构建
1、基于普通质粒的表达载体
①构建元件
a、调控基因转录的元件; ②用于基因打靶的表达载体构建
基因打靶是指利用同源重组将目的基因整合到受体细胞染色体的特定位点上。
包括:插入型打靶载体(一个位点同源重组,导致整个载体的插入)、取代型打靶载体(两个位点同源重组,导致外源基因取代靶基因序列)
a、基因敲除 是指通过基因打靶而使特定的靶基因失活的技术。; c、双置换法(两步打靶法)
敲除靶序列,引入突变基因。; d、基因敲入
基因敲入是指通过基因打靶将外源基因置于靶基因调控序列下游而受到调控的技术。;2、基于病毒的表达载体构建
3、基于YAC的表达载体构建
用于超大基因的表达。如210kb人乳清蛋白基因
四、外源基因的组织特异性表
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