第六单元 感染性疾病的免疫学检测.ppt

第六单元 感染性疾病的免疫学检测;实验一 乙型肝炎病毒表面抗体检测;实验目的;实验原理;试剂及器材 ;操作步骤 ;结果判断;实验讨论 ;注意事项;实验二 HBsAg不同检测方法的最低检测限（验证性实验） ;实验目的;实验方案;实验原理（一） 胶体金免疫层析技术;;实验原理（三）;实验试剂及器材;操作步骤（一）确定临界值浓度;C5;表1.不同浓度HBsAg标准物质稀释参照表;（二）胶体金操作方法 顺序将胶体金试纸条浸入血清（不要超过最高检测线）5秒钟后取出，平置，20分钟后判断结果。 ;（三）ELISA操作步骤 加样 不同稀释度的阳性血清（均做双孔测定）及阴性对照、阳性对照、弱阳性对照血清，分别加入对应的反应孔，留1孔做空白对照，置37 ℃水浴60min。 加酶 每孔加入酶标记抗体50ul,空白对照孔不加，置37℃水浴30min。 洗涤 甩去各孔内液体，拍干，用洗涤液洗孔6次，每次均拍干。 加酶底物/色原溶液 加显色剂A液、B液每孔各50ul， 37℃水浴30min显色。 加终止液 每孔50ul。 读数 在酶标仪上于450nm波长处读取吸光度值（A），以空白孔校零点，分别测定阴性对照、阳性对照、弱阳性对照及样本孔的A值。;操作实例：ELISA(双抗体夹心法）;结果判断;表3.重复检测次数与样本的实际浓度;表4.-