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发育生物学科教研室 第五章: 酶联免疫吸附分析(ELISA) 教师: 蓝兴国 蛋白组学分析技术课程之 日期: 2014. 6. 酶联免疫吸附分析（ELISA） 5.1 ELISA的概念； 5.2 ELISA相关的理论知识； 5.3 ELISA的类型； 5.4 ELISA的步骤及考虑因素； 5.5 ELISA的应用 5.1 ELISA的概念： 酶联免疫吸附分析（Enzyme-linker Immunosorbent Assay, ELISA）：它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫技术基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。 原理：它采用抗原与抗体的特异反应，将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。 测定的对象可以是抗体也可以是抗原。 5.2 ELISA相关的理论知识： 5.3 ELISA的类型： 直接ELISA 间接ELISA 夹心ELISA 5.4 ELISA的步骤及考虑因素： 包被（抗原、抗体） 洗涤 封闭 样品准备及加样 酶、底物、生色物质 显色 终止 读板与分析 ELISA板（固相载体）： 聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。 良好的ELISA板： 1）吸附性能好，空白值低，孔底透明度高