Notch信号通路在糖尿病肾病足细胞损伤中的研究论文（）.docVIP

Notch信号通路在糖尿病肾病足细胞损伤中的研究论文 / 组. / ,、正常糖高渗对照组. / / ,、高糖组 . ,、 / 高糖阴性质粒组 .,、高糖 / 、高糖 .质粒组 , / 质粒组 ,、高糖 组 / ,。分别经细胞同步化、 / 分组干预刺激、、、、小时后收集细胞,免疫细胞化学检测 检测 、、、和蛋白表达; 、、、、、、.、 一、 检测、、及 及蛋白表达;. 表达;和/染色检测足细胞凋亡率。 结果 糖尿病肾病患者临床病理表现及信号通路检测 ①光镜下观察,对照组肾小球、肾小管及肾间质未见明显异常;糖 尿病肾病组肾小球体积增大,基底膜弥漫或不规则增厚,细胞外基质增多, .结节形成,部分肾小管上皮细胞出现空泡变性,间质纤维化。②糖中文摘要 尿病肾病组空腹血糖、糖化血红蛋白、尿蛋白量、肌酐较对照组均明显增 多,而肾小球滤过率糖尿病肾病组患者比对照组下降。③免疫组化显示 、、、及在肾小球及肾小管均有表达, 糖尿病肾病组较对照组表达增多。 糖尿病小鼠肾组织信号通路的表达及缬沙坦对信号通 路和足细胞损伤的影响 ①光镜及电镜下观察,糖尿病组小鼠轻微肾小球体积增大,系膜基 质增多,基底膜不规则增厚,足细胞数量减少,足突融合,部分肾小管上 皮细胞出现空泡变性。②与对照组相比,糖尿病组小鼠尿蛋白从 周开始明显升高,随病程延长呈逐渐升高的趋势;糖尿病小鼠血糖 、尿素氮、肌酐比对照组小鼠增加,随病程延长 呈逐渐升高的趋势;与对照组相比,糖尿病组小鼠尿蛋白和尿含量 明显升高,给予缬沙坦治疗后尿蛋白和含量降低。③免疫组化结果 显示、、、和在对照组肾小球及肾小管 有少量表达,在糖尿病组表达明显增加; 检测显示,与对照 组比较,糖尿病组小鼠。肾组织中、、及从周 时开始升高,表达最高点在周,周时略有下降;蛋白在糖尿病 组比对照组表达增加,在糖尿病组各周次间表达无明显差异;糖尿病组 水平与对照组相比表达增加,最 、、和 高点在周,随后下降。④ 和 显示,糖尿病 组小鼠肾小球组织、、、和蛋白及、 水平与对照组相比增加,给予缬沙坦治疗后 、和 降低。⑤染色显示在糖尿病组小鼠肾组织中观察到凋亡细胞; 、及 .蛋白在糖尿病组小鼠肾小球组织中表达 比对照组增加,给予缬沙坦治疗后降低;.蛋白表达水平糖尿病组较 对照组降低,给予缬沙坦后表达升高;蛋白在各组间表达无明显差异; 流式细胞术显示糖尿病组小鼠肾小球内细胞凋亡增加,糖尿病缬沙坦组 降低,但仍高于对照组。 足细胞体外高糖培养对信号通路表达及足细胞损伤的影响 ①免疫细胞化学显示,、、、和在 正常糖对照组足细胞中有少量表达,给予高糖刺激后表达量明显增加;中文摘要 检测显示,和蛋白在高糖刺激足细胞小时 升高,小时表达最高,小时略有下降;蛋白在高糖刺激后其 它时间点的表达量是高糖刺激小时表达量的倍,高糖刺激~小时 足细胞中蛋白水平表达无明显差异;蛋白在高糖刺激小 时升高,小时达到项点,小时有所降低;表达在高糖刺激 和小时升高,然后随着刺激时间延长表达下降;高糖刺激呈时间依赖 性引起、和 升高,最高峰在小时; 最高点在高糖刺激小时,随后随着刺激时间延长而下降。② 和. 检测发现,高糖刺激引起、、 表达 、、蛋白及、、、 增加,.和转染足细胞后表达下降,可抑制足细 在高糖刺激后的过表 胞、、蛋白及、 达现象,但、蛋白及在高糖组和高糖组之间 无明显差异。③ 检测发现高糖呈时间依赖性刺激蛋白表 达,小时开始增加,小时达到最高点,而.蛋白在高糖刺激后 表达逐渐下降,最低点在小时; .在高糖刺激小时 开始增加,小时为最高点,之后逐渐减少;蛋白在高糖刺激下表 达逐渐增加,最高点在小时;蛋白在高糖刺激各时间点之间表达 无明显差异。④足细胞高糖培养并应用或.、质 粒转染后发现、及 .蛋白较高糖组表达下降, 但较正常糖对照组表达仍高,而.蛋白较高糖组表达增强,但较正常 糖对照组表达仍低,蛋自在各组间表达无明显差异。⑤荧光 染色及/染色显示高糖组较正常糖对照组细胞凋亡率升高, 转染组及高糖组细胞凋亡率比高糖组降低。 结论 在糖尿病肾病患者肾组织、糖尿病小鼠肾组织、高糖培养足细胞中 发现信号通路成员有过表达现象,提示通路在糖尿病肾病足 细胞中激活并可能参与足细胞损伤过程。 缬沙坦抑制糖尿病小鼠肾组织中信号通路的活化,同时抑制 蛋白尿和足细胞脱落,抑制凋亡相关蛋白表达,减少细胞凋亡,抑制肾小 球内细胞外基质沉积。提示缬沙坦可通过抑制信号通路来产生对糖中文摘要 尿病肾病的治疗效果。 在高糖培养的足细胞中,应用信号通路干扰质粒及抑制剂抑 制信号通路的活化后,可抑制凋亡相关蛋白表达,减少足细胞凋亡。 提示信号通路参与高糖诱导的足细胞损伤。 关键词:糖尿病肾病;信号通路;足细胞损伤;细胞外基质沉 积;凋亡英文摘要 ,: № . , , , , . . .