重组钝齿棒杆菌全细胞转化生产 l-瓜氨酸条件优化.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 刘倩妮 等/重组钝齿棒杆菌全细胞转化生产L-瓜氨酸条件优化 1889 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn November 25, 2017, 33(11): 1889−1894 DOI: 10.13345/j.cjb.170028 ©2017 Chin J Biotech, All rights reserved ·生物育种与工艺优化· 重组钝齿棒杆菌全细胞转化生产L-瓜氨酸条件优化 1 1 1 1 1 1 1,2 刘倩妮 ，徐美娟 ，张荣珍 ，王梅洲 ，张显 ，杨套伟 ，饶志明 1 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122 2 江南大学 食品科学与技术国家重点实验室，江苏 无锡 214122 刘倩妮, 徐美娟, 张荣珍, 等. 重组钝齿棒杆菌全细胞转化生产L-瓜氨酸条件优化. 生物工程学报, 2017, 33(11): 1889–1894. Liu QN, Xu MJ, Zhang RZ, et al. Production of L-citrulline by a recombinant Corynebacterium crenatum SYPA 5-5 whole-cell biocatalyst. Chin J Biotech, 2017, 33(11): 1889–1894. 摘 要: 实现了精氨酸脱亚胺酶 (ADI) 首次在钝齿棒杆菌Corynebacterium crenatum SYPA 5-5 中的高效表达。 通过Ni-NTA 亲和层析纯化得到纯化ADI ，经SDS测定其分子量约为46.8 kDa ，酶学性质研究发现ADI 的最适催化温度为37 ℃，最适pH 为6.5 ，ADI 在最佳催化条件下作用于L-精氨酸的米氏常数为 12.18 mmol/L， 最大反应速率为0.36 μmol/(min·mL) 。优化了重组菌全细胞转化产L-瓜氨酸的工艺条件，在最优条件下可一次 转化300 g/L L-精氨酸，转化速率达 8 g/(L·h)。进行重组菌5 L 罐发酵并进行罐上全细胞转化 300 g/L L-精氨酸， 一批菌体可进行多次转化，累计产量达 1 900 g 以上。 关键词: 精氨酸脱亚胺酶，L-瓜氨酸，全细胞转化优化，钝齿棒杆菌 Production of L-citrulline by a recombinant Corynebacterium crenatum SYPA 5-5 whole-cell biocatalyst 1 1 1 1 1 1 Qianni Liu , Meijuan Xu , Rongzhen Zhang , Meizhou Wang , Xian Zhang , Taowei Yang , and Zhiming Rao1,2 1 Key Laboratory of Industrial Biotechnology of Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University , Wuxi 214122, Jiangsu , China 2 State Key Laboratory of Food Science and Technology, Jiangnan University , Wuxi 214122, Jia