抗生素类药物的鉴别与测定.pptVIP

第十六章 抗生素类药物的分析; 与合成药物相比：结构、组成复杂 1、化学纯度低——三多 （1）、同系物多——庆大霉素含四 个主要组分 （2）、异构体多——半合成β-内酰 胺类抗生素均存在光学异构体 （3）、降解物多——四环素类存在 脱水、差向异构体; 2、活性组分易发生变异——微生物 菌株、发酵条件的改变均导致产品 质量发生变化(组分的组成或比例) 3、稳定性差——通常含活泼基团， 基团往往是活性中心（ 青霉素中的 β-内酰胺环）;二、抗生素药物的质量分析;（一）、鉴别试验;（二）、检查; 4、其它指标 （1）、多组分——组分分析（硫酸庆大霉素C组分的测定） （2）、悬浮时间与抽针试验 （3）、聚合物 （4）、杂质吸收度;（三）、含量测定或效价测定; 测定方法——管碟法和浊度法 管碟法——抗生素在摊布特定试验 菌的固体培养基内呈球面形扩散， 形成含一定浓度抗生素球形区,抑制 了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑 菌圈 通过比较标准品与供试品产生抑菌 圈的大小来测定供试品的效价; ; 优点——灵敏度高、需用量小，测 定结果较直观； 测定原理与临床应用的要求一致， 更能确定抗生素的医疗价值； 适用范围广——较纯的精制品、纯 度较差的制品、已知的或新发现的 抗生素均能应用；; 同一类型的抗生素——不需分离， 一次测定其总效价（效价测定的最 基本的方法） 目前理化方法逐渐取代了生物学法 分子结构复杂、多组分的抗生素— 生物学法是首选的效价测定方法; 2、理化方法——根据分子结构特 点，利用其特有的化学或物理化学 性质及反应而进行 对于提纯的产品以及化学结构已确 定的抗生素——较迅速、准确地测 定其效价，并具有较高的专属性; 化学方法——运用结构上官能团 的特殊化学反应（含有具同样官能 团就不适用，或需采取适当方法加 以校正 如果利用某一类型抗生素的共同结 构部分的反应——测得的结果代表 总的含量，并不一定能代表抗生素 的生物效价。 ; 理化方法测定必须与生物效价吻合 目前各国药典所收载的理化方法— HPLC法，如?-内酰胺类、四环类、大 环内酯类大多采用HPLC法测含量; 3、活性——效价单位表示 指每毫升或每毫克中含有某种抗 生素的有效成分的多少.用单位(u) 或微克 （?g）表示。 一种抗生素有一个效价基准，同 一种抗生素的各种盐类的效价可根 据其分子量与标准盐类进行换算。 ; 如1毫克青霉素G钠盐定为1667单位； 1mg青霉素G钾盐的单位（u） =1667×356.4/372.5=1595 u/mg。 理论效价（实际样品往往低于理 论效价） ;三、抗生素的分类（p.406）;三、抗生素的分类;第二节 β-内酰胺类抗生素; 青霉素族的母核——6-氨基青霉烷 酸（简称6-APA） 头孢菌素族的母核——7-氨基头孢 菌烷酸（简称7-ACA）。; 青霉素族——侧链RCO-与母核6- APA结合；三个手性C原子C2、C5、C6; 酰胺基上R以及R1的不同，构成各 种不同的青霉素和头孢菌素 表16－1 P.411 ;（二）、性质;（2）旋光性——青霉素族含三个手 性碳原子，头孢菌素族含两个手性 碳原子（定性和定量） ;（3）紫外吸收特性 头孢菌素族母核—— 具有O＝C－N－C＝C结构 R取代基——苯环等 共轭系统 青霉素族母核——无共轭系统 侧链酰胺基上R取代基 ——苯环等共轭系统;（4）β－内酰胺环的不稳定性 β-内酰胺环——活性中心，性质 活泼，最不稳定部分 稳定性——含水量和纯度有关 干燥——较稳定，室温条件下密 封保存，贮存3年以上 水溶液——很不稳定，随pH和温 度而有很大变化; 青霉素水溶液——pH6～6.8较稳定 酸、碱、青霉素酶、羟胺及某些金 属离子（铜、铅、汞和银）或氧化 剂等——水解和分子重排，β-内酰 胺环的破坏而失活性;青霉素降解反应;头孢噻吩降解反应;二、鉴别试验;羟肟酸铁反应式; 2、类似肽键的反应(茚三酮反应) 具有-CONH-结构(取代基有α－氨 基酸)——显双缩脲和茚三酮反应 头孢氨苄,头孢羟氨苄，头孢拉定， 头孢克洛侧链均为氨苄基，中国药典 采用TLC鉴别、检查时,以茚三酮为显 色剂; 3、其它呈色反应 （1）、侧链含有-C6H5-OH——与 重氮苯磺酸试液产生偶合 （2）、可与变色酸-硫酸、硫酸-硝 酸、铜盐等试剂反应;（二）各种盐的反应;（三）、光谱法; 2、紫外分光光度法（UV） （1）λmax——供试品配成适当浓 度的溶液，直接测定UV光谱，根据 λmax或λmin处的吸收度鉴定 （2）水解产物的最大吸收波长— 供试品在一定条件下水解，测定水 解产物的λmax;