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动物细胞融合过程示意图 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 灭活病毒诱导细胞融合的原理： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 思考题 1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？ 酶解法，如纤维素酶和果胶酶 2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？ 无需，因为动物细胞无细胞壁 3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、电激等物理方法；PEG等化学方法 4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？ 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导 5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能 提 问 ？ 1.抗体是由何种细胞产生的？ 效应B细胞（浆细胞） 2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 3. 引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？ 动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上 4. 简述获得抗体的传统途径？ 抗原 动物体 抗体 抗原不纯 抗体不纯 二、单克隆抗体 刺激 浆细胞 6.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 体外培养单个效应Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体 7.体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？ 5.这种方法获得的抗体有什么缺陷？ 产量低，纯度低，特异性差 与骨髓瘤细胞融合 单克隆抗体的制备 抗原 小鼠 效应B细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 细胞融合，筛选 细胞培养 筛选 体外培养 体内培养 单克隆抗体 特定的杂交瘤 拓展：聚乙二醇处理后，培养液中存在哪几种细胞？ B-B B-瘤 瘤-瘤 未融合的B细胞 未融合的瘤细胞 补救练习 1.动物细胞融合技术最重要的用途是 （ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B 2.单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ 　 ）A.B淋巴细胞 B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞 D 3.（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是 （　 ） A.效应B细胞 B．T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞 　　 D．杂交瘤细胞 A B C D