宫颈癌HPV1618感染及p53、pcNA表达相关性研究.docVIP

精品论文 参考文献 宫颈癌HPV1618感染及p53、pcNA表达相关性研究 雅安市名山县人民医院 625100 摘要：目的 分析宫颈癌HPV16/18感染及P53、PCNA的相关性，讨论宫颈癌HPV16/18感染及P53、PCNA与宫颈癌的关系。方法 选取本院2012年5月-2013年4月收治的60例患有宫颈癌的患者，通过免疫组织化学方法，检测P53、PCNA蛋白表达情况，对临床资料进行统计学分析。结果 宫颈癌HPV16/18阳性组中，P53与PCNA表达增强，呈正相关，阳性组与阴性组有明显差异（Plt;0.05）；临床Ⅱ期的P53和PCNA指标要明显高于临床Ⅰ期，有明显差异（Plt;0.05）。结论 HVP16/18是宫颈癌并发的主要原因，并促使P53、PCNA蛋白阳性率增高，在宫颈癌并发中具有重要作用。 关键词：宫颈癌；感染；pcNA 宫颈癌是一种非常常见的女性肿瘤疾病，其发病率和死亡率都比较高。近年来，这种疾病的发病率呈逐年上升趋势，所以当前研究的重点是分析其发病机制，研究出合理有效的治疗方法。90%以上的宫颈癌患者伴有HPV感染，HPV16/18都属于高危型感染，与宫颈鳞癌直接相关。本次研究主要是针对HPV16/18及P53、PCNA表达相关性意义，现汇报如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选取本院2012年5月-2013年4月收治的60例患有宫颈癌的患者，按照HPV16/18检查的阴阳性进行分组，阳性组有34例患者，年龄在28-57岁，平均年龄为（43.1plusmn;5.1）岁。阴性组有26例，年龄在29-64岁，平均年龄为（48.7plusmn;4.2）岁。宫颈癌的病例病理分级参考WHO女性生殖肿瘤分类，Ⅰ级20例，Ⅱ级19例，Ⅲ级21例。FIGO临床分析，I期33例，Ⅱ期27例。所有宫颈癌的患者的年龄、疾病无统计学意义（Plt;0.05），具有可比性。 1.2方法 采用免疫组化SP法检测P53、PCNA的表达情况[1]。 1. 用石蜡包埋组织，并进行切片，在62℃下烤片2-5小时，脱蜡至水； 2. 用3%的双氧水孵育15分钟，用蒸馏水冲洗，通过PBS清洗3次。在微波炉中进行加热10分钟，修复抗原，然后取出冷却。 3. 在每张切片上滴入50mu;l的第一抗体，即P53、PCNA。 4. PBS冲洗3次，每次5分钟左右。滴入加辣根过氧化酶标记的二抗，在37℃下孵育12-20分钟，再进行PBS冲洗，每次5分钟左右。 5. DAB显色，在室温下放置20分钟，然后用自来水冲洗30分钟。 6. 苏木素复染，常规脱水透明后中性树胶封片。用已知表达阳性的宫颈鳞癌切片作为阳性对照，用PBS作为阴性对照。 1.3判断标准 每张切片上都需要在400倍的显微镜下观察，随机选取10个瘤细胞区，相关人员要在每个癌细胞区选取100个肿瘤细胞，然后对这些肿瘤细胞进行观察，记录阳性细胞的数量，并计算出阳性细胞所在比例。如果小于25%，则为阳性，如果比例大于等于25%，则为阴性。P53、PCNA阳性染色细胞核出现棕黄色颗粒为阳性判断标准。 1.4统计学分析 采用SPSS18.0软件检验，各组间用X2检验，Plt;0.05说明有统计学意义。 2结果 60例宫颈癌患者，HPV16/18阳性组的P53、PCNA阳性比例明显高于阴性组，具有明显差异（Plt;0.05），具体内容如下： 3讨论 宫颈癌患者的HPV感染细胞最终会导致出现宫颈癌，子宫颈癌HPV感染的阳性率在55%-85%左右，其中HPV16型在总数的45%-78%左右，HPV18型占总数的12%-32%左右。 很多恶性肿瘤，例如胃癌和肺癌等，通过免疫组织化学方法进行检验P53的阳性率较高，能够达到45%-52%。在相关研究结果中[2]，人体的细胞内的P53蛋白的主要机制有：P53基因突变，突变型P53蛋白拥有较长的半衰期，长时间会造成基因积累。由此基因毒性的堆积会诱导致癌因素，从而损伤正常细胞中的DNA，造成P53基因活性上涨。P53蛋白高表达会导致野生型P53蛋白堆积，这种情况下导致胃癌、肺癌的出现。宫颈癌P53基因突变率比较低，所以相关学者认为宫颈