青年奶山羊下丘脑催产素样免疫反应神经元分布.pdfVIP

青年奶山羊卞丘脑GnRH神经元的分布 陈树林范光丽赵慧英卿素珠毛海鹏张艳李耀辉 (西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100) 为了探讨促性腺激素释放激素(GnRH)在奶山羊下丘脑的表达特点，本实验采用灵敏 度较高的免疫组化SP法研究了GnRH神经元在6—8月龄青年奶山羊下丘脑中的分布。结 果表明。分泌GnRtf的神经元主要分布在视上核、下丘脑前核、室旁核和弓状核，此外在 视前内侧核、视前外侧核、交叉上核、下丘脑外侧区、视上弥散核、腹内侧核、腹外侧核 及乳头体各核团也较多，有少量分布在前连合核、终纹床核、穹窿周核、环核、视前交叉 上核和背内侧核。阳性神经纤维仅见于视前内侧核、视前外侧核、弓状核、乳头体后核、 乳头体内侧核等核团：在正中隆起和第三脑室室周可见中等数量的阳性纤维。结果提示， GnRI／神经元在青年奶山羊下丘脑分布广泛，且GnPd／可经第三脑室(脑脊液)、腺垂体、 血管三条途径释放，通过血液循环最终作用于靶细胞而发挥生理作用。 关键词：GnRH下丘脑奶山羊免疫组织化学 基金项目；国家自然科学基金资助 作者简介：陈树林(1965一)，男。陕西汉中人．副教授，硕士。研究方向：动物神经生物学· 陈树林1孙志宏2卿素珠1赵慧英1范光丽1林磊1张艳1 2．延安大学生物系延安716000) (1．西北农林科技大学动物科技学院陕西扬凌712100 摘 要{为了研宄奶山羊不同生殖周期中催产素的表达特点，奉实验采用超撤免裹组化链霉素 抗生轫蛋白一过氧化物肆渣研究催产素免癌臣直轫在8—10月龄青年龄奶山羊下丘脑的分布．结 果显示：分泌催产素的神经元主要分布在室旁棱和视t较．在穹蕾同棱、腹内懈棱．腹外侧棱、 交又上括和乳头体上棱较多，有少量分布在弓状核、室用挺、背内侧棱，环棱．前连械·FY臼J 前核、下丘脑外侧区．乳头侏上械、乳头体内懈棱．阳性细胞的形态有田形，卵田形、多角形； 有的阳性细胞突起明显．根据细胞中阳性物质的多少和挂目中阳性细胞数量，可分为强阳性、中 等阻性，弱阳挂被目．提示：催产素广泛存在于青年奶山单下丘脑中20多个棱匿。 关键词：下丘脑催产素免疲组织化学法青年奶山羊 ．160— 下丘脑是人和动物的神经内分泌的中心及内脏机能的重要控制中心，而催产素 (Oxytocin，OT)是F丘脑中最早发现并阐明结构的神经肽，由9个氨基酸组成，除对生殖 活动的调节中发挥着重要作用外。OT对心血管功能、消化功能、体液渗透压、神经免疫 和体温等也有调节作用，并与应激反应、学习记忆、睡眠与觉醒、痛觉调制、动物的行为 活动等有密切关系…。生理功能的产生必定有其形态学基础，OT合成部位的研究成为该 领域的热点。对仓鼠”1、大鼠”1、猪“3、人…、奶山羊…和树鼠甸…的OT台成部位的定 位研究结果表明，合成OT的部位已由传统概念的室旁核(PvN)和视上核(SON)扩大到F丘 脑的广泛区域。上述研究均是研究了某种动物某一生理阶段的0T分布，尚未见到对oT 在不同生殖周期奶山羊下丘脑分布的系统研究，而不同生理时期oT分布有较大的变化， 因此，本实验用特异性强、灵敏度高的免疫组化链霉素抗生物蛋白一过氧化物酶 布进行研究，为进一步总结不同生理期下丘脑0T的分布特点、生理功能及生殖调控机理 提供系统的形态学方面资料。 1材科和方法 1．1材料8—10月龄健康奶山羊8只，临床健康，体重25--35kg。山羊颈动脉放血致死， 向两侧颈总动脉同时注入37C生理盐水800lnlj中去残血。随后灌注4C的含4％多聚甲醛 后固定12h。之后浸入4C的20％蔗糖PB液，组织块沉底后即可切片。用冰冻切片机对 下丘脑做连续切片，厚度35啪。每只羊下丘脑制得两套切片，一套做Nissl染色以确认 下丘脑核团位置，部分用作阴性对照实验；一套进行免疫组化sP法染色。 1．2方法免疫组化sP法染色：抗鼠SP超敏试剂盒，福卅迈新公司进口分装；鼠抗∞ 抗体，第四军医大学神经科学研究所提供；葡萄糖氧化酶，美国SIGMA公司生产。将切片 经0．Olmol／L的PBS缓冲液冲洗3次，每次lOmin，然后按以下步骤进行反应，各步骤问 按常规脱水、透明、封片。阴性对照染色：用0．Olmol／L的PBS缓冲液代替鼠抗0T抗体 孵育切片，其余步骤同上，进行对照实验，确定该方法的特异性。 Nissl染色：