转金属硫蛋白Metallothionein基因蓝藻的优化培养及其在重金属废水处理中的应用.pdfVIP

全国铅污染监测与控制治理技术交流研讨会 n)基因蓝藻的 转金属硫蛋白(Metallothionei 优化培养及其在重金属废水处理中的应用 1曾文炉 1茹炳根2邹宁 1北京大学生命科学学院 北京 100871 2鲁东大学生命科学学院 山东烟台264025 化及其耦合等方面进行了初步的研究，以期为重金属废水的治理和蓝藻生物技术向现实生产力转化提供新 的思路。本文主要结论如下： (1)转MT聚球藻的构建与筛选 SP． PCC 7002细胞，经筛选、分离得到转化细胞后，再利用PCR鉴定，证明外源基因mMT-I己整台在聚球 耐受性比野生聚球藻提高了2．100倍以上。 (2)转MT聚球藻的优化培养 葡萄糖和醋酸钠无论在光自养和黑暗条件下均对转MT聚球藻细胞的生长没有促进作用，高浓度条件 下反而对细胞有害；添加适量的碳酸氢钠可促进转MT聚球藻细咆的生长。 硝酸铵对转MT聚球藻细胞的生长有抑制作用；转MT聚球藻细胞具有一定的尿素利用能力，但高浓 度尿素对细胞生长有害：硝酸钠对转MT聚球藻细胞的生长具有促进作用。 初始pH8．30适宜于细胞生长：向培养体系中通入适当流量的C02气体可明显地促进了转MT聚球藻 的生长，不但终细胞浓受有所提高，而且缩短培养周期。 umol 光照强度对转MT基因聚球藻的生长有明显影响。转MT聚球藻生长的最适光强为95．6photon m．2s．1。 气升式生物反应器由于能够提供均匀的光照，以及良好的气液传质性能，能显著促进转MT聚球藻细 胞的生长。 首次利用响应面方法，对转MT聚球藻细胞的培养基进行了优化。优化后的培养基组成为：NaHC03 1．69魄／L，NAN038．579／L，其他成分同MediumA。培养基初始P日8．367。 (3)转MT聚球藻对重金属废水的净化 长及其对重金属的净化性能存在明显差异。 虽然两种藻都能在含适量浓度重金属的废水中生长，但生长状况都不如其在标准MediumA培养基中 的表现。在培养条件相同的情况下，转MT聚球藻细胞的生长明显优于野生藻。 随着培养进程的延续和细胞浓度逐渐提高，体系中的重金属离子浓度逐渐降低。重金属离子浓度降幅 度最大的时间都出现在试验开始1．3天左右。 野生藻和转MT聚球藻对重金属的净化率在相同的时间段内比较接近，但转MT聚球藻比野生藻具有 更大的重金属耐受性、净化能力和重金属相对吸附量。 Cd／g 107 全国铅污染监测与控制治理技术交流研讨会 Pb／g干重和138．993mgHg／g干重，而野生聚球藻细胞对模拟重金属废水中Cd，Pb和Hg 干重，118．980mg Pb／g干重和0．944mgHg／g干重。‘ 的吸附量分别为3．417ragCd／g干重，53．175mg (4)重金属废水净化耦合系统． 建立了转MT聚球藻细胞生长及其对Cd，Pb和Hg的净化动力学模型。 批式操作的微藻细胞与重金属废水净化耦合系统，重金属离子的净化率与培养时间、细胞比生长速率 和净化速率常数密切相关：培养时间的延长和细胞浓度的上升，有助于提高重金属的净化率。 连续操作的微藻培养与重金属废水净化一级耦合系统，净化率与体系中的细胞浓度、重金属净化速率 常数和重金属废水停留时间有关：细胞浓度越浓，重金属净化速率常数越大，停留时间越长，越有利于重 金属的净化。 对于二级和多级连续操作的微藻培养与重金属废水净化耦合系统，增大单元级数有