酶法不对称性还原氯代苯乙酮类化合物的初步研究.pdfVIP

K019 酶法不对称性还原氯代苯乙酮类化合物的初步研究 解晴 吴坚平 杨立荣 （浙江大学材料与化学工程学院 生物工程所 浙江 杭州 310027 ） 摘 要 本文应用从酿酒酵母 B5 细胞中粗提出的，具有光学选择性还原氯代苯乙酮类化合物的 氧化还原酶进行了初步的酶学性质的考察。该氧化还原酶在外加辅酶的情况下最适反应温度为 30 ℃，最适 pH 在 7 －8 之间，摇床转速对其反应影响不大。但随着反应时间的延长，反应速率降低， 温度越高，酶的失活速度越快；在全细胞反应中，基本不存在这种失活现象。底物与产物对酶还 原反应均无明显的抑制现象，而在全细胞反应中，底物与产物的浓度对反应有较大的影响。 关键词 2’-氯-苯乙酮 2’-氯-苯乙醇 不对称还原 酶反应 PRELIMINARY STUDY ON THE ASYMMETRIC REDCTION OF 2’-CHLOROACETOPHENONE BY ENZYME FROM SACCHAROMYCES CEREVISIAE Xie Qing, Wu Jian Ping and Yang Li Rong (Institute of Bioengineering, College of Material Science and Chemical Engineering, Zhejiang University, Hangzhou 310027) abstract The asymmetric reduction of chloroacetophenone with reduction enzyme from baker ’s yeast (Saccharomyces cerevisiae) was studied in this article. The optimum temperature of the reductive reaction was 30℃. The range of pH was from 5 to 10 and optimum pH existed from 7 to 8. The influence of shaking to the reaction was not evident. The reaction rate decreased with the time prolonging. The inactivation of the rude reductase was quicker at higher temperature. These two instances did not exist in the whole cell transformation. Neither high substrate concentration nor high product concentration inhibited the reductive reaction with the rude reductase, whereas these two inhibitions were very serious in the same reaction with whole cell. Key words: 2’-Chloroacetophenone, 2-Chloro-1-methylbenzyl, asymmetric reduction enzyme reaction 引 言 手性药物是新药研究的热点方向，氯代苯乙酮等羰基类化合物经手性还原可得到一系列 手性醇，这些手性醇是制备许多手性药物的中间体[1] 。在生物法还原苯乙酮类化合物时，通 常有利用完整微生物细胞和直接应用还原酶来还原底物酮获得相应手性醇两种方法[2] 。微生 物法还原无需加入反应所需的辅酶，可以降低成本，是比较经济的方法；但在研究还原酶的 一系列酶学性质和催化反应机理时，应用无细胞体系更为适合。反应过程如图： 1 Cl