葡萄糖调节蛋白78介导心肌细胞低氧预处理的保护作用.pdfVIP

葡萄糖调节蛋白78介导心肌细胞低氧预处理的保护作用 潘燕霞1林丽2袁文俊2 1．福建医科大学，福建福州，350004} 2．第二军医大学，上海，200433 摘要低氧预处理是机体婶抗握饬的内埠性保护机制，应激蛋白如热体克蛋白70 (70一kDh髑ts}Iock 关键．78一kD葡萄糖调节蛋白(glucoseIregul8ted 位于内质网．低糖或无糖、映血，低氧、氧化应激以度内质网c82+平衡牵乱等应敬刺激均可上 蛔胞凋亡．在培养的海马细胞，2一腻j艮葡萄耱谤导内质两表选G如78，能减轻海马细胞氧 化应敏损伤和善氨魏胺的兴奋毒作用，而GRP78反艾塞棱苷馥刘增加海马蛔胞的死亡．这些 研究蛄果表明GRP78在保护细胞避免应激刺激引起的细胞死亡方面具有重要作用． 神经细胞GR舯8表达可减少海鸟细胞延迟性死亡，恒GRP78表达在低氧预处理中作用尚不 心肌细胞低氧预楚理的保护作用． 关键镯 生理学心肌细胞低氧顸处理 一、材料和方法 (一)主要仅器与试剂 (Hit毫chi，日本)，全忘动血气分析仪(R矗pidlab cia 体·HSP70单党隆抗体，Actin多克陵抗体(Santa cr比，美国)． (二)心肌细胞原代培养 mmol／L m1．5％C02孵箱37℃褥育24h后，更换培养液并加入0．1 壤养3～4d的细胞． ·82。 (三)·心肌细胞低氧预处理和低氧损伤模型 灌95％№～5％C02混会气15min以上)，在95％NI～5％C妫低氧孵弯30min(培养液氧分压为 箱中孵霄30 (四)心肌细胞活力检潮 每孔加入150“l 以不加细胞只加培养液的培养孔设为空自慰照孔，其余步骤楣同，用空白对照孔调节。 (五)培养液上清LDH和SOD活性及MDA含量潮定 台量(南宗建成生物技术工程公司)． (六)Westemblot检测HSP70、GRP78蛋白 (七)GRP78反又寡核警酸的应用 (八)统计擎分析 析，若差异显著，嬲进一步用Sludent_NⅫ搬小Keuls 二、结果 (一)低氧预处理螬低氧心肌细胞活力及上清液LDH、_sOD及MDA的影响 MDA分别为50。8士3．4U／L和1．88主o．12咖l／L明显高于对照组的27．s士1-9 0．1l姗ol／L(p0．D1．n—12)，SOD为1s．7士4．1U／ml明显低于对照组的33．6±2．8 ·83· 为41．8士2．7 U／ml商 结果提示低氧预处理可减轻心肌细胞延迟性低氧损伤，提高缎胞存活率． 舯 帅 钟 蛐 A 星II目 钟 啡 。 c．耵Hnl uI℃ Ibpd出IⅡtI儿即峨越 n0 4U C 神 圣211 暑 妄