TO型生物制片透明剂在病理制片中的应用.docVIP

精品论文 参考文献 TO型生物制片透明剂在病理制片中的应用 周平安＊ 何春燕 齐彬 徐琼 曹丽芳 (广东省农垦中心医院病理科 524000) 【关键词】TO型生物制片透明剂 病理制片 应用 在病理技术工作中，组织的透明、切片的脱甲苯由于价格便宜、透明效果好、作用时间短，而被广泛应用于病理工作中。蜡，切片的透明、封固剂的制备都离不开透明剂的使用。长期以来，在病理制片过程中，二苯类是一种有毒溶剂，对人的造血系统、神经系统、呼吸系统级具有毒害作用，长期接触容易导致头晕、失眠、肢体震颤、免疫力下降等，对人体健康不利。因此，我科改用TO型生物制片透明剂代替二甲苯［1］，经过五年的实践，效果非常满意。 1 材料与方法 1.1 材料 TO型生物制片透明剂(简称TO试剂，广西农学院岑溪松香厂生产)，我院外科送检病理标本。 1.2 方法 ①按照病理检查的目的和要求切取适当大小的组织块。②使用全自动组织脱水机对切好的组织块进行固定，脱水、透明、浸蜡，透明是采用TO试剂代替二甲苯，时间是30分钟/缸，共二缸。③将处理好的组织常规石蜡包埋，在石蜡切片机上切成3-4um的切片。将切片放入60-65℃左右烤箱内烤30分钟即可，取出即放入TO试剂中脱蜡，时间 8-10分钟/缸，共三缸。④常规HE染色后烤干切片。⑤用中性树胶封固，阅片(中性树胶采用TO试剂代替二甲苯进行溶解)。 2 结果 透明：时间比二甲苯多10分钟/缸,组织透明良好，透明后浸蜡良好。切片：不易脆裂，组织软硬适中，厚薄均匀(3-4um)，脱蜡：脱蜡干净彻底，时间与二甲苯无明显差异。 封固：TO试剂在中性树胶中溶解后封固，透光度好，切面可长期保存，粘度好，无褪色。阅片：HE染色鲜艳、均匀、胞核、胞质清晰。 3 讨论 TO试剂是一种以优质松节油为主要原料，并采用特殊配方合成的无色芳香透明液体，它有松香气味，不溶于水，挥发性好，松节油在空气最高允许浓度为300g/m3［2］，gt;25度能与95%乙醇互溶，能溶解石蜡、树胶等。TO试剂折光率1.46，与玻片的折光率1.50相似，因而能使其透明和封固的切片镜检清晰。 TO试剂安全无毒无臭味:透明效果理想;长时间浸泡组织不会使组织变脆，还能增强浸蜡效果，反而有利于切片;不与水汽混合，即使在潮湿的环境中使用，也不会因吸收水汽而浓度下降;不易变质，可长期存放。 TO试剂在脱水过程中，按正常的脱水步骤操作，把二甲苯换成TO试剂，透明时间控制在20-30分钟左右 (夏季短点，冬季长点)，TO试剂在25度以下溶解石蜡比较慢，当温度超过35度时，溶解蜡的速度明显加快，50度时溶解石蜡的速度与二甲苯差不多。在冬季，如果工作室内的温度较低，建议把玻片放盛有TO试剂的梁色缸中，然后把染色缸放烘箱中脱蜡，分二至三缸，脱蜡时间8-10分钟左右。在气温较高的季节或常年气温较高的省份，可以把烘箱中刚烤好的玻片连同染色架趁温度高时直接放入不加温的TO试剂中，分三缸，脱蜡时间 20分钟左右，TO试剂还能用来稀释中性树胶，比例为1:1，不过溶解速度慢，可以放在烘箱中使其较快充分溶解。 TO试剂还可用于其它病理制片中，如：免疫组化、冰冻切片、特殊染色等，该产品由广西农学院与广西岑溪松香厂联合研制，经广西壮族自治区药检所的毒理检验，安全无毒，产品推出后在全国大面积使用，经过五年的实践，我们认为，该产品透明效果理想，切片质量???二甲苯无异，还不会出现二甲苯浸泡时间长易碎片的情况，松节油为植物油对人体无毒害，能在工作中安全使用，目前是代替二甲苯作为透明、脱蜡、溶解和封固的最佳试剂。 参 考 文 献 [1］张晓明,崔进,等,松节油取代二甲苯在病理技术中应用的研究［J］.哈尔滨医科大学学报，1998.10. [2］谭常兰,刘付华,等,松节油代替二甲苯快速脱蜡在病理切片中的应用［J］.怀化医专学报，2003,2(1):91.