FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖凋亡及cyclin D1、cyclin A表达的影响.pdfVIP

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2018-01-03 发布于北京
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FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖凋亡及cyclin D1、cyclin A表达的影响.pdf

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Bulletin2007 ·645· 中国药理学通报ChinesePharmacological May；23(5)：645～50 及cyclin A表达的影响 D1、cyclin 卢洁1，盛光耀1，岳保红2，邹湘1，徐学聚1，赵晓明1，白松婷1，许培荣3 (郑州大学1．第一附属医院儿科；2．第一附属医院检验科；3．细胞生物工程研究室，河南郑州450052) 中国图书分类号：R一392．24；R342．2；R394．2；R394．3；白血病以外的肿瘤细胞有FLT3表达‘2卅J，所以 R733．705 FLT3是白血病的特异性标志，它的靶向治疗深受关文献标识码：A文章编号：1001—1978(2007)05—0645—06 注。摘要：目的探讨FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖、目前已研制出了几种FLT3小分子抑制剂，但凋亡及cyclinD1、cyelinA表达的影响。方法体外构建其特异性和效率都不令人满意。RNA干扰(RNA FLT3靶向短发夹状干扰RNA(FLT3．shRNA)，转染HL-60细胞，RT—PCR、流式细胞术(FCM)鉴定FLT3的表达；CCK．8法方式，是由双链RNA介导的转录后基因沉默，是肿检测细胞增殖活力；FCM检测细胞周期；AnnexinV染色法瘤相关基因靶向抑制的另一重要手段bJ。FLT3是检测凋亡；RT—PCR及Western A在 blot检测cyclinD1，cyclin mRNA、蛋白水平的表达。结果FLT3一shRNA转染可下调 FLT3的表达，它对FLT3mRNA和蛋白的抑制率分别达果及机制尚不清楚。本研究通过设计和构建FLT3 in．靶向的短发夹状干扰RNA(FLT3．small (81．66±10．25)％，(76．76±11．23)％。FLT3表达下降后 hairpain 细胞增殖活力受到抑制，转染48h抑制率达(31．66± terfering 2．97)％，72h达(33．10±3．43)％；细胞生长曲线低平，缺乏 D1、究它对细胞增殖、凋亡及细胞周期蛋白cyclin 指数增殖特征。与对照组比，转染48h细胞周期重新分布， cyclin Go／Gl期(58．48±6．17)％的明显上升，S期(27．72± 能性。 5．10)％下降；细胞早期凋亡率(8．95±0．88)％上升；细胞内 1材料与方法 cyclinD1的mRNA、蛋白表达下降，cyclinA的表达无明显改 D1表达有变。结论FLT3靶向RNA干扰通过下调cyclin IU·L。