RNA干扰DJ-1基因抑制喉癌细胞的增殖.pdfVIP

·374· 生垡昱盎塑噬去塑处型盘查塑!生i旦筮箜鲞筮!翅堡塾鱼』堡!虫i翌出型塑!旦!型堕塑垒墅坚：丛型2塑!：!丛：箜：塑!：』 ．论著 RNA干扰DJ一1基因抑制喉癌细胞的增殖 祝小林文卫平 蒋爱云 雷文斌苏振忠 【摘要】 目的探讨RNA干扰(RNAi)抑制喉癌Hep-2细胞DJ-1基因的表达及观察其细胞效 应。方法设计合成3对特异性针对人DJ-l基因的小干扰RNA(siRNA)，脂质体法转染H印-2细 胞，实验分为4组：瞬时转染非特异性siRNA对照组及转染特异性siRNA3组(siRNAl、siRNA2、 siRNA3)。采用RT—PcR检测DJ-lmRNA，蛋白免疫印迹法检测DJ一1蛋白，流式细胞仪检测细胞凋亡 及四甲基偶氮唑蓝(M，ITl’)比色法检测特异性siRNAl组对H印-2细胞效应。结果本实验设计合成 的3对特异性siRNA均不同程度地抑制DJ-l基因表达，其中特异性siRNAl组抑制效果最佳。MrI’I- 比色法结果显示特异性siRNAl组(终浓度50 nm彤L、100一oL／L)对Hep-2细胞增殖具有抑制作用。 流式细