利用RNA干扰技术创制高直链淀粉马铃薯新材料.pdfVIP

第37卷第2期 南京师大学报(自然科学版) Vol.37 No.2 2014年6月 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY(Natural Science Edition) June,2014 ■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■ 利用RNA干扰技术创制高直链淀粉马铃薯新材料 朱彩云,黄翠香,于　 伟,王忠亚,杨金金,徐盼盼,徐　 春,季　 勤 (淮阴师范学院生命科学学院,江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室,江苏 淮安223300) [1] [摘要]　 直链淀粉由于其独特的理化性质,在工业上有着广泛的应用.郭志鸿 等利用 RNA干扰技术抑制马 铃薯中两类淀粉分支酶亚基基因Sbe1和Sbe2 的表达,有效提高了马铃薯的直链淀粉含量.本研究利用RNA干 扰技术,构建马铃薯SBE Ⅰ(the ndogenesis starch branching enzyme Ⅰ)和SBEⅡ(the endogenesis starch branching enzyme Ⅱ)单基因以及SBE Ⅰ和SBEⅡ双基因的RNA干扰双元表达质粒载体.采用农杆菌介导法将重组基因转 化马铃薯品种Désirée后,得到3个转化系列.分别对转基因马铃薯植株进行PCR鉴定,对转基因淀粉表观直链 淀粉含量和凝胶化特性等性质进行分析.结果表明,利用 RNA干扰技术单独抑制 SBE Ⅰ或SBEⅡ基因的表达, 不能提高直链淀粉含量,甚至会导致其含量降低.而当SBE Ⅰ和SBEⅡ基因表达同时受到抑制时,超过50%的转 基因株系直链淀粉含量高于对照.转化株系表观直链淀粉的含量最高可达到49.1%,与对照(28.5%)相比提高 了20.6%. [关键词]　 转基因马铃薯,SBE基因,RNA干扰,直链淀粉 [中图分类号]Q786　 [文献标志码]A　 [文章编号]1001-4616(2014)02-0112-07 Using RNAi Technology to Produce High-Amylose Potato New Material Zhu Caiyun,Huang Cuixiang,YuWei,Wang Zhongya,Yang Jinjin,Xu Panpan,Xu Chun,Ji Qin (School of Life Sciences,Huaiyin Normal College,Jiangsu Key Laboratory for Eco-Agricultural and Biotechnology Around Hongze Lake,Huaian223300,China) Abstract:Amyloseisextensivelyusedinindustrialapplicationsbecauseof it’suniquephysicochemicalproperty.Zhihong Guo inhibted expression of two potato starch branching enzyme subunit genesSbe1and Sbe2 by using RNA interference technology,effectively improved the amylase content in potato.To develop transgenic potato plants with high-amylose starch in tubers,the endogenesis starch branching enzyme Ⅰ(SBE Ⅰ)and Ⅱ(SBE Ⅱ)genes were,single or simutaneously,targeted for RNA mediated gene silencin