植物突变体库的构建及突变体检测研究进展.pdfVIP

2010年第6期 植物突变体库的构建及突变体检测研究进展 郭建秋，雷全奎，杨小兰，马 雯，张向召 (洛阳市农业科学研究院，河南洛阳471022) 摘要：突变体是研究基因功能的重要材料，为此，介绍了创造突变体的方法，特别是理化诱变方法 以及突变体的检测方法等方面的研究进展。 关键词：植物突变体；构建；检测方法 中图分类号：Q319文献标识码：A 文章编号：1004—3268(2010)06—0150—06 随着大量基因序列和EST资料的积累，后基因 现揭开了矮化育种的序幕；细胞质雄性不育株的发 组时代诞生了。功能基因组学是后基因组时代的重 现使水稻三系法杂种优势的利用成为现实；而光 点研究内容，主要研究生物有机体内各种基因的生 (温)敏核不育株的发现则为采用两系法利用水稻亚 物学功能，进而了解所有基因如何协调发挥作用，完 种间的杂种优势铺平了道路。但是自发突变的频率 成一系列的生长发育过程。要精确了解每个基因的 很低，在高等生物中，大约10万个到1亿个生殖细 功能及基因间的相互作用，必须分析单个基因和多 胞中才会有1个生殖细胞发生突变，且许多突变通 个基因的突变表型以及它们的时空表达剖面。随着 过表型无法鉴定而丢失，很难进行系统收集。即使 新技术新方法的不断创新开发，分析鉴定基因功能 获得了感兴趣的突变株，要分离突变基因并进一步 的方法越来越多，并逐渐形成功能基因组学的分支 鉴定其功能也是相当困难的，因为自发突变体的遗 学科。目前已经发展了多种分析鉴定基因功能的方 传背景非常复杂。 法，其中最直接最有效的方法是构建饱和的基因突 1．2体细胞无性系变异 变体库，通过突变体分析鉴定基因功能。因此，突变 体细胞无性系变异是组织培养中的普遍现象， 体库的构建是功能基因组学的基础。为此，综述了 泛指在细胞、组织和器官培养过程中，培养细胞和再 创造突变体的方法以及突变体的检测筛选方法等方 生植株中产生的遗传变异，又可细分为自发无性系 面的研究进展。 变异和诱发无性系变异。体细胞无性系变异的产生 没有种属特异性，出现的频率一般比较高[3“]。其 1创造突变体的方法 变异频率随培养时间的延长而提高，且结合化学诱 突变体库有不同的分类方法[1]。按照产生突变 变和利用选择压力进行细胞突变体筛选可实现一定 体的方法大致可分为自发突变体库、体细胞无性系 程度的定向诱变[5。]。植物通过体细胞无性系变异， 变异突变体库、理化诱变突变体库和插入突变体库 可产生一系列有益的新性状，对植物品种改良和选 4类。 育新品种具有重要意义。但近年来的遗传转化实践 1．1 自发突变 表明，经历组织培养和再生阶段后，常表现出一些非 自发突变是指自然条件下发生的突变，是生物 目的性状的变异，其原因属体细胞无性系变异还是 变异的重要来源，是自然进化的基础。自发突变为 外源基因的插入诱变，往往很难确定[8]。体细胞无 人类提供了极有价值的研究材料。李玮等[2]在芥菜 性系变异已在农作物的育种中广泛应用，并已获得 型油菜品系L638一g中发现了几株无致死效应的了抗逆、可遗传的新品系[5。。赵成章等[9’10]从水稻 天然叶片黄化突变体，并研究揭示了该突变体的黄 幼胚愈伤组织中，筛选出一些早熟、矮秆、千粒重高 化机理及生物学特性。在水稻中，矮秆突变株的发