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海南蒟cDNA文库的构建及评价.pdf

热带作物学报2013.34(4):636—640 Chinese of Journal Tropical Crops 海南药cDNA文库的构建及评价 范 睿】’2一. 凌 鹏1’4,顾文亮12,3,李付鹏1,2,3, 郝朝运1—23. 闰 林1.2.3,黄丽芳1,2,3,邬华松1.2‘3+ 1中国热带农业科学院香料饮料研究所.海南万宁 571533 2农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室.海南万宁 571533 3海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室.海南万宁 571533 4佛罗里达大学柑桔研究与教育中心.美国佛罗里达33850 摘 要 全长eDNA文库构建是改良胡椒性状的分子机理研究基础。有助于重要相关基因的克隆、功能分析、 调控及其利用。以性状优良并具代表性的海南药(聊erhoirumense)为试材,采用优化的In-FusionSMARTeffM cDNA Directional ConstructionKit技术,构建叶片材料的全长cDNA文库。结果表明:文库的滴度为 Library 2.0x106cfu/mL,文库容量为1.3x106 cfu。从文库中随机挑取20个克隆进行质粒DNA提取、PCR及酶切鉴定, 结果显示:插入片段大小为1.0~2.0kb,重组率为100%,表明该文库质量较高,可满足后续研究需要。 关键词海南药;叶片;cDNA文库;构建 中图分类号 9949.732.3 文献标识码 A ConstructionandEvaluationofcDNA of hainanense LibraryPiper FAN Ruil·2一,LING Pen91一,GU Chaoyunl·2一, Wenlian91·2一,LIFupen91·2一,HAO YAN Linl,2r,HUANG Lifan912¨.WUHuason9123 1 Research SpiceandBeverageInstitute,Chinese AcademyofTropicalAgricuLturalSciences 571533,China Wanning,Hoinan 2Key ResourcesUtilizationand LaboratoryofGenetic ofspiceBeverageCrops, 571533,China MinistryofAgricuLture,Wanning,Hainan 3HainanProvincial and KeyLaboratoryofGeneticImprovementRegulationfor Quality and Tropica

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