重组人白细胞介素21真核表达载体的构建及体外药效学研究.pdfVIP

堡直圄堕匿堂壅蠢垫!!!生!；旦垫旦箜丝鲞筮!塑巡!丛鲤』兰￡毡!!y!!：丝!基垒!：达!!墅b塑垫!垫!Q ·431· 实验研究 重组人白细胞介素21真核表达载体 的构建及体外药效学研究 饶桂荣，朱梅，杨妙青，杨富强，王洪敏，吴庆洲，陈光明 【摘要】目的构建人的真核表达载体pVAX／IL-21，并进行体外细胞转染实验的鉴定研究。方法采用PCR扩 增技术扩增含有自细胞介素21(interleukin21，II．一21)的基因，亚克隆于真核表达载体pVAXl，并进行酶切和测序分析； 将所构建的质粒转染Cr3S-7细胞检测其表达情况。结果 白表达，其中转染48h的表达水平较高，达到45 强的体外细胞转染活性，为进一步研究IL-21的生物学功能如抗肿瘤活性等提供了实验基础。 【关键词】人白细胞介素21；构建；转染；基因表达 914．1 【中图分类号】R 【文献标识码】A Constructionandinvitro ofHIInterleukin21 Plasmid PImrmacodynm们des Eukaryotic Expression RA0渤i—tong，ZHUMei，yANG F“一qiang，wANG Qng—zhou，CHEN Miao-qing，yANG Hong—min，WU Guang- Center the ming．Research Disease，No．458of Liberation ofHepatic HospitalPeople’s A聊叫，GuangzhouCmangdong 51060()．吼ina Correspondingauthor：CHENCruang-ming，E-nmil：immun@126．com To effective theevalua- [Abstract]Objectivedevelop eukaryoticexpressionplasmids，pVAX／IL一21。andpe．,ffoml tion oninvitrotransfection Interleukin were PCR study experiment．Methods21(IL21)genesamplifiedby technique， andthensubclonedinto double and new wereana— eukaryoticexpressionpVAXIby enzymes palsmid ligase．Theplasnfids byendonucleaserestrictionandDNA constructedweretransfectedintoCO§7cellsin lyzed sequencing．Theplasmids vitrowith was The 2000．The quantifiedELIS八Resultssegmentsanddirec— reagentLipofectamineTMexpression by gene tionof insert