薄层鉴别(8.3).pptVIP

五、薄层色谱耐用性实验 1、三种不同厂家生产的薄层板的影响 2、温度和湿度的影响 （1）常温、常湿条件下进行试验 （2）低温条件下进行试验 （3）高湿条件下进行试验 温度对层析行为的最明显的影响是分离度和Rf值。经常遇到的一种情况是同样的试验需要在夏天做，又须在冬天做，或者在南方和北方的试验室重复试验，这就遇到温度不同造成的影响，而使结果不易重现。最基本的要求是在薄层色谱记录中同时记录试验时的温度和相对湿度。 第二节中药薄层色谱鉴别中供试品溶液制备的注意事项及方法 在检验中药真伪方面通常采用的检测手段有形态鉴别、理化鉴别和光谱色谱分析等。而薄层色谱由于其独具的长处而被广泛应用于中药分析。 1个薄层鉴别----110个品种 4个薄层鉴别----49个品种 5个薄层鉴别----7个品种 6个薄层鉴别----5个品种 3个薄层鉴别----134个品种 2个薄层鉴别----182个品种 《中国药典》2005年版一部中的鉴别方法主要为薄层鉴别，其中： 一、 影响薄层色谱展开效果的主要因素 供试品溶液制备 点样 薄层板 展开剂 温度 湿度 显色 二、 对供试品溶液制备进行分析和讨论 由于中药成分的复杂，未知成分多，供试品溶液中含有的物质较多，其中有被测定成分，同时也有其他“杂质”成分，因此常常由于相互干扰或背景污染而难以得到满意的分离效果，有时甚至难以辨认，对复方制剂尤其如此。所以为了充分发挥薄层色谱技术在中药分析方面的优势，提高色谱的分离度和重现性，供试品溶液的制备（净化），是一个非常重要甚至是关键的步骤。 三、 常用的供试品净化方法 我们常常希望样品中的成分尽可能多的被提取出来，所以最常用的试剂是甲醇或乙醇，导致被测成分和许多其他“杂质”成分均被提取出来，因此供试品的净化就更为必要。 净 化 方 法 单一溶剂提取法 不同极性的溶剂分步提取法 柱色谱法 升华法 酸性、碱性有机溶剂提取。如利用生物碱类成分在碱性条件呈游离状态，用三氯甲烷或乙醚将其有选择的提取出来而舍弃其他成分，使供试品溶液净化。 可以依次用不同极性的溶剂，如石油醚→乙醚→三氯甲烷→乙酸乙酯→正丁醇进行提取，对供试品进行分离、纯化。 常用的吸附剂有大孔树脂、氧化铝、硅胶、聚酰胺等，根据供试品的特点选择不同的吸附剂。 对含有挥发性成分的供试品，可采用华法。 对成分复杂的供试品，有时可同时采用2～3种净化方法对供试品进行处理。 四、复杂成分供试品净化的注意事项 1. 采用没有毒性或毒性较小的试剂作为提取溶剂和展开剂，减少对试验人员和环境的污染。 2. 专属、科学、经济的原则。 3. 利用各种被测成分的理化性质不同，采用不同的提取方法。 4. 对多个中药材逐一进行薄层鉴别时，某个薄层的供试品溶液中除含有被测定成分，同时也有大量其他“杂质”成分。但这些“杂质”成分常常同时又是其他薄层中的被测定成分。 5. 制定质量标准时应对列为薄层鉴别目标的各味药材进行整体分析，根据各个药材中的特征性成分的理化性质、含量高低，决定提取的方法、步骤。 五、处方中药材所含成分检索与提取方案设计 1、试验方法应首选《中国药典》的方法；其次应参考文献资料，确定预试方案；如没有文献报道．应查询组方药材所含化学成分，根据其特点，决定提取步骤。 2、应同时采用对照品和对照药材为对照物。 3、选用对照药材是经济与合理的选择。 4、应结合提取工艺制定相应的提取方法。 丹参化学成分 成分检索与方案设计 按组方所含药材成分，查询文献或根据经验，拟定初试方法。 按实验设计方案进行试验，观察、记录，并初步判定薄层鉴别方法的可行性。在复方制剂研究预试验中，在同一种展开系统中应将对照品、对照药材都点在同一块薄层板上。观察试验结果，为进一步试验提供更多的薄层色谱信息。 方案设计 试验预试 六、实例-1艾附暖宫丸 白芍—芍药苷 黄芪—黄芪甲苷 （4）取本品9g，剪碎，加水5ml浸润，加水饱和的正丁醇30ml，摇匀，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品------- 六、实例-1艾附暖宫丸 （5）取本品9g，剪碎，加水5ml浸润，加水饱和的正丁醇30ml，摇匀，超声处理10分钟，滤过，滤液用氨试液洗 涤2次，每次30ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品------ 六、实例-2白带丸 白芍—芍药苷 黄柏—盐酸小檗碱 六、实例-2白带丸 （2）取本品5g，研细，加乙醇10ml,冷浸1 小时，时时振摇，滤过，滤液浓缩至干，残渣加乙醇0.5ml 使溶解，作为供试品溶液。